[일반생물학실험]단백질의 정량 및 정성 분석

최초 등록일
2018.09.20
최종 저작일
2018.09
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정성분석(뷰렛방법)을 통해 단백질의 포함 유무를 분석하고 정량분석(BCA법)을 통해 단백질의 양을 측정해보는 실험레포트입니다.

목차

1. 실험 목적
2. 실험 이론 및 원리
3. 실험 기구 및 시약
4. 실험 방법
5. 실험 결과
6. 토의 사항

본문내용

1. 실험 목적
가. 정성분석(뷰렛방법)을 통해 단백질의 포함 유무를 분석하고 정량분석(BCA법)을 통해 단백질의 양을 측정한다.

2. 실험 이론 및 원리
가. 단백질
모든 단백질은 널리 존재하는 20가지 종류의 아미노산이 특징적인 선상의 서열로 공유결합된 것이다. 이러한 각 아미노산은 각각의 특유의 화학적인 성질을 나타내는 곁사슬을 가지고 있으며 이 20가지 종류의 전구체 분자로 된 집단은 단백질 구조의 언어로 쓰이는 알파벳과 같다고 볼 수 있다. 단백질은 몇 개의 아미노산 잔기로 이루어진 비교적 간단한 펩타이드에서 분자량이 수백만이나 되는 거대한 중합체(polymer)까지 존재한다.

아미노산은 R기의 극성과 전하(pH7에서)에 따라 5가지 종류로 분류할 수 있다.

비극성, 지방족 R기
알라닌, 발린, 류신, 아이소류신, 글라이신, 메싸이오닌, 프롤린
방향족 R기
페닐알라닌, 타이로신, 트립토판
극성, 비전하 R기
세린, 트레오닌, 시스테인, 아스파라진, 글루타민
양전하(염기성) R기
라이신, 아르지닌, 히스티딘
음전하(산성) R기
아스파트산, 글루탐산

아미노산은 그 산-염기 특성이 다양하며 특징적인 적정곡선을 갖는다. 아미노산(R-CH--COOH)은 분자 내에 아미노기(-)와 카르복실기(-COOH)를 지니는 화합물인데, 용액의 pH에 따라 아미노기는 -로, 카르복실기는 -로 존재하게 된다. 일반적으로 아미노산은 산성상태에서는 R-CH--COOH의 (+)로 하전되고, 알칼리 상태에서는 R-CH--의 (-)로 하전된다. 그러므로 아미노산을 양성전해질이라고 부른다. 아미노산 수용액의 pH를 정해진 pH로 조절하면 아미노산 분자 내에 (+) 이온의 숫자와 (-)이온의 숫자가 똑같게 되는데, 이 때의 pH를 아미노산의 등전점(isoelectric point)이라고 한다. 아미노산은 등전점에서 침전하는 성질이 있다. 그러므로 여러 아미노산이 혼합되어 있는 요액에서 어느 특정한 아미노산을 침전, 분리시키고자 한다면 이 용액의 pH를 이 아미노산의 pH로 조절하면 된다.

참고 자료

표준 식품분석학, 채수규, 지구문화사, 1998년 2월 10일 초판 발행, p.283-293
레닌저 생화학 상, David L. Nelson, Michael M. Cox, 월드 사이언스, 2014.02.20., p.75-76

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