SDS PAGE

귄이
최초 등록일
2018.07.17
최종 저작일
2018.06
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본문내용

1.
- 전 실험에서 사용했던 Ni-NTA 아가로스 수지에서 나온 단백질 샘플들을 SDS PAGE를 이용하여 단백질 크기를 확인해보는 것이 실험 목적이다.

2.
- 다음 사진과 같이 밴드가 사선으로 나란히 나타났는데 실험기구의 오작동으로 사선으로 나타난 것이지 표시한 빨간색 테두리에서 거의 동일한 높이로 나타났다. 물론 밑에 몇 가지 밴드도 육안으로 확인할 수 있었다. 빨간색 테두리 안의 단백질 크기는 약 55kDa이다.

3.
- 일단 이번 실험에서 가장 큰 문제로 생각되는 요인 중 하나는 SDS PAGE에 전류를 흐르게 하는 과정에서 PAGE를 담은 버퍼가 담긴 통이 새는 바람에 다른 실험 조와는 다르게 사선 모양으로 밴드가 나타나게 되었다. 물론 높이는 거의 비슷하지만 그래도 정확하게 측정할 수 있었던 실험값에 오차가 발생하게 된 것이다. 이전 실험에서 단백질 solution의 Band가 가장 뚜렷이 나타났던 번호가 순서대로 3, 4 였는데 이번 SDS 실험을 통해 확인해본 결과 그와 유사하게 3번째 4번째에서 밴드의 두께가 두껍게 나타난 것을 확인할 수 있었다. 이를 토대로 단백질의 농도차이를 육안으로 확인할 수 있었다.

참고 자료

Campbell Biology 9th edition, Chap 20, 2011.
Molecular Cloning: A Laboratory Manual (3rd edition). 2001.
Wikipedia
귄이
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