Polymerase chain reaction (PCR)에 의한 DNA절편의 증폭

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2016.10.02
최종 저작일
2013.06
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이번 실험에서는 수업시간에 배웠던 PCR 반응을 하였다. 우리가 했던 실험은 세균에서 DNA를 추출하지 않고 콜로니의 일부를 이용한 colony PCR 실험이었다. 저번 시간에 배양했던 E.coli의 colony를 이용하였다. microtube에 D.W, 2X buffer, dNTP, Taq polymerase, primer를 순서대로 넣고, 아래 그림과 같이 배지에서 colony를 선택하여 microtube 안쪽 벽에 발라주었다. 시료들을 첨가할 때 왜 D.W, 2X buffer, dNTP, Taq polymerase, primer를 순서대로 넣는지 의문이 들어 조사해본 결과 일반적으로 재료들을 첨가하는 순서는 첨가량이 많은 것부터 넣는다고 한다. PCR 반응은 매우 민감한 반응으로 영향을 주는 요인으로는 primer의 농도, template 및 PCR 산물의 변성온도, Taq polymerase의 활동성 등이 있다. primer 농도가 높을 경우 반응을 저해하여 misprimin

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