단백질 정량 분석 UV-vis spectrophotometry Bradford assay 결과 보고서

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2016.08.31
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2016.03
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이번 실험은 Bradford assay 와 UV-vis spectrophotometry을 이용하여 몰농도 값을 모르는 BSA와 Lysozyme의 농도를 알아내는 것이 목적이었다.
우선 lysozyme을 실험에 사용하는지 몰랐기 때문에 예비 보고서에 작성할 수 없었다.
그래서 간단히 lysozyme에 대해 작성하겠다.
우선 펩티도글리칸은 진정 세균의 세포벽을 혀성해 세균이 저장액 등에서 용혈이 되는 것을 방지 한다. N-아세틸글루코사민과 N-아세틸뮤람산이 β(1→4)글루코시드 결합을 형성하고 있다.

이 때 Lysozyme은 진정세균의 β(1→4)글루코시드 결합을 가수분해하여 세균의 세포벽을 파괴하는 역할을 한다. (그림 2) 세포벽이 파괴된 세균은 삼투압에 의해 팽압을 이기지 못하고 용혈되어 죽는다.

먼저 표준 용액의 농도를 1 mg/mL로 주어졌기 때문에 각각의 시료에 대해 몰질량을 이용해 몰농도를 알아야 한다.
그 후 이것을 1/2, 1/10, 1/20으로 희석한 몰 농도 값을 구하여 bradford assay를 할 수 있다.

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