[일반생물학실험] bradford assay를 이용한 단백질의 정량

최초 등록일
2016.04.23
최종 저작일
2016.04
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목차

1. 실험 목적
2. 실험 이론 및 원리
3. 실험 기구 및 시약
4. 실험 방법
5. 주의 사항
6. 실험 결과
7. 토의 사항
8. 참고 문헌

본문내용

1. 실험 목적
1.1. 수용액에 녹아있는 단백질의 양을 Bradford 방법으로 정량한다. 이를 위해 표준 용액을 이용한 표준곡선의 작성과 비색정량법을 습득한다.

2. 실험 이론 및 원리
2.1. 단백질의 구조
단백질의 구조는 4단계로 나누어진다. 즉 1차, 2차, 3차 및 4차가 그것이다. 단백질은 아미노산이 펩티드 결합에 의해 연결된 폴리펩티드 사슬로 되어있다. 단백질의 1차구조는 폴리펩티드 사슬을 구성하고 있는 아미노산이 어떤 순서로 배열되어 있는가 하는 것이다. 또한 시스테인이 연결되어 형성되는 디설피드의 위치도 1차구조에 포함된다.
단백질의 1차구조(primary structure)는 여러 가지 면에서 중요하다. 즉, 단백질의 고차구조를 알기 위해 필요하며, 단백질의 기능을 이해하는 기초가 된다. 단백질의 2차구조(secondary structure)는 직선으로 연결되어 있는 아미노산들이 갖고 있는 삼차원적인 관계를 말한다. 특히, 펩티드 사슬이 규칙적으로 반복되는 입체구조를 뜻하여 크게 두 종류, 즉 α나선(α-helix)과 β판(β-pleated sheet)으로 나누어진다. 두 번째의 2차구조는 2개 이상의 펩티드 사슬간의 수소결합에 의해 형성되며, 이 경우 각각 펩티드 사슬은 β사슬이라고 부른다. 이 구조는 완전히 평면형이 아니고 펩티드 사슬을 형성하는 결합의 각도 때문에 다소 주름지게 되므로 β판이라고 부른다.
세 번째 단계의 단백질구조는 3차구조(tertiary structure)이다. 이는 삼차원적이면서도 생물학적으로 활성을 갖는 입체구조를 뜻한다. 3차구조에 있어서 중요한 점은 1차구조에서 멀리 떨어져 있는 아미노산이 3차구조에서는 매우 가까이 위치할 수 있다는 것이다.
네 번째 단계에서 단백질구조는 4차구조(quaternary structure)이다. 4차구조는 두 개 이상의 소단위로 이루어진 단백질의 경우 각각의 단위 공간에서의 상대적인 위치를 가리킨다. 이들 소단위들은 비공유결합에 의해 연결되어지거나, 디설피드 결합과 같은 공유결합으로 연결되기도 한다.

참고 자료

분자생물학, 한국분자생물학회 편, 아카데미 서적, 2006, p.50~55
알기쉬운 기기분석, 고명수 외, 유한문화사, 2006, p.130~131
동물영양학, 고영두 외, 유한문화사, 2006, p.304~305

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