[분자유전학] PCR (피씨알, 중합효소연쇄반응)

최초 등록일
2015.12.31
최종 저작일
2015.12
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목차

I. Introduction
II. Material
III. Method
IV. Result
V. Discussion

본문내용

I. Introduction
PCR은 DNA 중합효소의 반응 즉 DNA 복제가 연쇄적으로 일어나는 반응이다. 그러나 세포에서의 복제같이 염색체가 전부 복제되는 것은 아니고 좁은 장소나 정해진 한 곳에서만 일어난다. 그 결과 하나의 출발 DNA 단편 분자로부터 수백 만개로 복사하여 증폭시킴으로써 많은 양의 순수한 시료를 얻을 뿐만 아니라 유전자 분리를 위한 다양한 접근 방법을 제공한다. 현재 PCR은 미량의 DNA로부터 DNA의 증폭, 미량의 mRNA로부터 cDNA합성, DNA sequencing, 유전자 결함이나 유전자서열의 다양성 검사 등에서 매우 활발하게 이용되고 있다.

<중 략>

Methods
PCR tube에 mixture를 만든다.
Template DNA5μl
Primer(F)2 μl
Primer(R)2 μl
D.W41 μl
Total50 μl
PCR 기계를 setting한다.
초기 변성95℃2분
변성95℃1분
35회 반복
결합67℃30초
연장72℃1분
72℃10분
PCR이 끝나면 electrophoresis로 확인한다.

참고 자료

Robert F.Weaver, 분자생물학, 라이프사이언스, 2003,
Neil A. Campbell, 생명과학, 라이프사이언스, 2001,
미정영치, 신분자유전학, 신일상사, 2001,
T.A Brown, 유전자 클로닝 입문, 탐구당, 2004,

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