PBS buffer 조제

목차

1) 서론
2) 재료
3) 실험방법
4) 결과
5) 결과분석
6) 토론

본문내용

1)서론: 세포 내부에는 여러 가지 이온들이 있다. 이 세포가 “물”이라는 외부환경을 만나면 ‘삼투현상’에 의해 세포 안으로 물이 들어오다 터지게 된다. 이를 방지 하기 위해 ‘등장액(Saline)’을 사용하게 된다.
‘PBS(Phosphate based saline)’는 HPO4와 H2PO4에 의해 pH를 완충할 수 있는 등장액으로, 삼투현상에 의한 세포사도 방지하면서 pH를 완충하는 역할 을 할 수 있다.
이번 실험에서는 이처럼 세포배양 외 여러 생화학실험에서 널리 사용되는 PBS(1x)를 직접 만들어 본다.


2)재료: Na2HPO4 0.14g(10mM), KH2PO4 0.024g(1.8mM), KCl 0.02g(2.7mM),
NaCl 0.8g(137mM), 증류수, 100mL 비커, 50mL 튜브 2개, 부피플라스크, 약숟가락


3)실험방법: 1. 증류수 100mL를 부피플라스크로 따라 비커에 정확히 따른다. (비커의 눈금이 보통 정확하지 않기 때문에 부피플라스크로 정확한 양을 측정한 뒤 비커로 옮긴다.)

2. 비커의 100mL 중 20mL를 부피플라스크에 옮긴 후 비커에 수면의 위 치를 펜으로 마킹한다. (시약을 증류수에 녹임으로써 발생하는 부피의 오차를 줄이기 위해 20mL를 덜어내고 나중에 다시 마킹 부위까지 넣 는 방식으로 실험한다.)

3. Na2HPO4 0.14g, KH2PO4 0.024g, KCl 0.02g, NaCl 0.8g 각각의 시 약을 정확히 덜어내어 80mL가 들어있는 비커에 완전히 녹인 후 따라 놓았던 20mL의 증류수를 비커의 눈금 위치에까지 정확히 따른다.(PBS 의 경우 모든 시약이 물에 잘 녹기 때문에 부피 변화가 거의 없다.)

참고 자료

생화학(Biochemistry) 제6판, 저자 Mary K. Campbell, Shawn O. Farrell, 라이프사이언스 51~53p
최신 생화학, 저자 TRUDY MCKEE, James R. McKee, 교보문고, 첨부이미지