플라스미드(plasmid) DNA의 분리(Isolation) : 알칼리 세포파괴법(Alkaline lysis)

최초 등록일
2015.03.20
최종 저작일
2015.03
7페이지/한글파일 한컴오피스
가격 1,500원 할인쿠폰받기
판매자xox**** 90회 판매
다운로드
장바구니
자격시험 이용후기 이벤트

소개글

Alkaline lysis 방법은 세균 세포를 먼저 SDS(이온성 계면활성제 및 단백질 변성제: 세포막의 지질 성분을 용해시켜 세포막 파괴) 및 NaOH (alkali)로 처리하여 세균 세포를 부수는 동시에 DNA 염기쌍의 수소결합을 파괴하여 이중나선 구조를 분리시킨다. 이어서 산성 용액(potassium acetate)을 가하여 중화시키면, 염색체 DNA는 크기가 너무 커서 변성 전의 정상의 상태로 복원되지 못하고 더욱 엉키게 된다. 염색체 DNA와 단백질은 potassium과 SDS간에 형성되는 complex 속에 갇혀 흰색의 침전물로 가라앉는다. 반면 크기가 작고 공유결합으로 연결되어 있는 supercoiled plasmid DNA는 정상적으로 복원이 되어 용액에 녹아 상등액에 남게 된다. 이 방법은 plasmid DNA와 염색체 DNA간의 구조적 차이에 기인하여 plasmid DNA만을 분리하는 방법이다.

목차

1. title : Isolation of Plasmids (pET15bm)

2. Abstract

3. Principle
⑴ What is the Plasmid ?
⑵ RNA is structurally very similar to DNA. How can you remove RNA during plasmid isolation?
⑶ How do you break the cell membranes ?
⑷ What is the role of ethanol in the current experiment?
⑸ How do you determine the concentration of the plasmid isolated using UV/Vis spectrometry?
⑹ What is the role of phenol in the phenol in the phenol extraction (a clssical method) for plasmid purification ?

4. Material and method
⑴ Material
⑵ Method 1. Alkaline Lysis
2. DNA 농도의 결정
* UV/Vis spectroscopy
* Nanodrop

5.Result

6.Discussion
(1) DNA 농도
(2) DNA 순도
(3) 고찰
(4) 그 외의 방법 : boiling 방법 (alkaline lysis처럼 miniprep의 한 방법)

7. Reference

본문내용

1. title : Isolation of Plasmids (pET15bm) -Protocol 1. Miniprep: 알칼리 세포파괴 방법에 의한 플라스미드 DNA의 분리

2. Abstract Alkaline lysis 방법은 세균 세포를 먼저 SDS(이온성 계면활성제 및 단백질 변성제: 세포막의 지질 성분을 용해시켜 세포막 파괴) 및 NaOH (alkali)로 처리하여 세균 세포를 부수는 동시에 DNA 염기쌍의 수소결합을 파괴하여 이중나선 구조를 분리시킨다. 이어서 산성 용액(potassium acetate)을 가하여 중화시키면, 염색체 DNA는 크기가 너무 커서 변성 전의 정상의 상태로 복원되지 못하고 더욱 엉키게 된다. 염색체 DNA와 단백질은 potassium과 SDS간에 형성되는 complex 속에 갇혀 흰색의 침전물로 가라앉는다. 반면 크기가 작고 공유결합으로 연결되어 있는 supercoiled plasmid DNA는 정상적으로 복원이 되어 용액에 녹아 상등액에 남게 된다. 이 방법은 plasmid DNA와 염색체 DNA간의 구조적 차이에 기인하여 plasmid DNA만을 분리하는 방법이다.

3. Principle⑴ What is the Plasmid ? 플라스미드란 세포 내에서 발견되는 염색체 외의 이중가닥 DNA로서 독립적 복제 능력을 가지는 유전인자들의 집합체이며 염기쌍의 수가 수천에서부터 수십만까지 그 크기가 다양하다. 주로 항생물질에 대한 저항성을 나타내는 유전자를 포함하고 있다. 대부분 환형 분자이나 일부 박테리아는 선형 플라스미드를 가지고 있고, 그람양성 박테리아의 플라스미드는 정상적인 복제과정과는 다소 다른 회전환 복제과정을 거치기 때문에 단일가닥 DNA가 많이 생기게 된다. 복사본수(copy number)는 플라스미드마다 다르고 박테리아 세포는 한 종류 이상의 플라스미드도 가질 수 있다. 예를 들면, 세포 하나가 두 가지 다른 유형의 플라스미드를 가질 수 있는데, 한 플라스미드는 복사본이 수백 개이지만 다른 유형은 복사본이 단지 한 개뿐일 수 있다.

참고 자료

최신 실험 미생물학; Editor, 미생물 및 면역학 분과회. Eds.; 1st ed; 신일상사, 2001; pp107-110⑵ 응용 미생물학 실험; Editor, 유주현.; Editor 변유량. Eds.; 1st ed; 효일, 2007; pp210-224
Molecular Genetics of Bacteria; Editor, Larry.S. ; Editor, Wendy. C., Eds.; 2nd ed; ASM Press, 2003; pp 159-000.
최신 미생물실험; Editor, 오계헌. Eds.; 1st ed; 신광 문화사, 2005; pp235

자료후기(2)

자료문의

ㆍ이 자료에 대해 궁금한 점을 판매자에게 직접 문의 하실 수 있습니다.
ㆍ상업성 광고글, 욕설, 비방글, 내용 없는 글 등은 운영 방침에 따라 예고 없이 삭제될 수 있습니다.
ㆍ다운로드가 되지 않는 등 서비스 불편사항은 고객센터 1:1 문의하기를 이용해주세요.

판매자 정보

xox****
회원 소개글이 없습니다.
판매지수
ㆍ판매 자료수
1
ㆍ전체 판매량
90
ㆍ최근 3개월 판매량
3
ㆍ자료후기 점수
평균 A+
ㆍ자료문의 응답률
받은문의없음
판매자 정보
ㆍ학교정보
  • 비공개
ㆍ직장정보
  • 비공개
ㆍ자격증
  • 비공개
  • 위 정보 및 게시물 내용의 진실성에 대하여 해피캠퍼스는 보증하지 아니하며, 해당 정보 및 게시물 저작권과 기타 법적 책임은 자료 등록자에게 있습니다.
    위 정보 및 게시물 내용의 불법적 이용, 무단 전재·배포는 금지되어 있습니다.
    저작권침해, 명예훼손 등 분쟁요소 발견시 고객센터의 저작권침해 신고센터를 이용해 주시기 바랍니다.

    찾던 자료가 아닌가요?아래 자료들 중 찾던 자료가 있는지 확인해보세요

    • 한글파일 Plasmid miniprep 생화학실험보고서 3페이지
      분리하는 방법은 크게 Alkaline lysis prep, boiling ... 용이하게 해준다. 2) Lysis buffer (SDS, NaOH ... DNA의 순도는 260nm/280nm 흡광도비로 결정할 수 있다. 왼쪽
    • 워드파일 Plasmid DNA preparation예비레포트(Alkaline lysis miniprep,Boiling miniprep,Lithium miniprep) 2페이지
      먼저 Alkaline lysis miniprep(Bimboim, Doly ... 있다. boiling miniprep는 적은 양의 plasmid분리 ... 할 때 쓰이는 방법이지만 분리plasmid DNA는 alkaline
    • 한글파일 플라스미드 DNA 분리 결과 Report 6페이지
      lysis miniprep alkaline lysis procedure ... EDTA solution Ⅱ : 0.2M NaOH 1.0% SDS SDS ... DNA 분리 실험 목적: 박테리아에서 플라스미드를 정제하는 실험으로 pET
    • 한글파일 A학점 보장, 생화학 Plasmid 추출 및 DNA 정량 예비레포트 8페이지
      alkaline lysis method invented by the ... typical plasmid DNA yield of a miniprep ... II(Solution II / NaOH/SDS soln
    • 한글파일 생화학실험 예비보고서 Plasmid purification & DNA 전기영동 (Agarose gel) 5페이지
      , Alkaline lysis product를 이용하여 Plasmid DNA를 ... : plasmid DNA를 소량 추출하는 방법 ① Alkaline lysis ... Plasmid DNA를 분리하는 방법으로 Mini-prep 중 가장 보편
    • 한글파일 E-coli Plasmid DNA 정제 4페이지
      ③ Lithium miniprep - Alkaline lysis와 유사 - 가장 ... 빠르게 plasmid DNA를 분리하는 방법 다. Alkaline ... alkaline lysis method를 이용한 대장균의 plasmid DNA를
    • 한글파일 알칼리 세포파괴 방법에 의한 플라스미드 DNA의 분리 3페이지
      plasmid DNA를 소량 분리하는 방법으로 miniprep이라고 부른다. 그 중 ... -Buffer (Lysis buffer): 1% SDS, 200mM NaOH ... DNA의 분리 2.Abstract: plasmid DNA분리
    더보기
    상세하단 배너
    우수 콘텐츠 서비스 품질인증 획득
    최근 본 자료더보기
    플라스미드(plasmid) DNA의 분리(Isolation) : 알칼리 세포파괴법(Alkaline lysis)