형질전환

목차

1. 실험 번호: 실험 주제
2. 실험 목적
3. 실험의 이론적 배경 및 주의사항
4. 시약 및 재료
5. 실험 방법
6. 결과 및 고찰
7. 참고문헌

본문내용

. 실험 번호: 실험 주제
- 실험2. 형질전환(Transformation)

2. 실험 목적
- plasmid DNA를 이용하여 E.coli의 형질전환을 알아보기 위하여
- 세균이 가지는 유전물질을 알아보기 위하여
- E.coli의 transformation 실험을 통해서 유전 공학에 많이 쓰이는 transformation의 기작을 이해하고 그 방법을 익힌다.

3. 실험의 이론적 배경 및 주의사항
- 배경 :
① 형질전환
형질전환이란 외부 DNA를 숙주세포 내에 넣어주어 세포가 원래의 성질과는 다른 새로운 유전형질을 추가로 얻게 되는 것을 말한다.
E.coli의 형질전환은 초기에는 발견이 되지 않았으나 박테리아를 찬 CaCl2로 처리한 다음 잠시 열처리를 하면 박테리오파지가 세포로 들어가 파지를 형성 한다는 사실에 의해 처음 관찰되었다. 이와 같은 처리는 박테리아가 DNA를 흡수할 수 있는 수용능상태(competence)로 일시적으로 유도하는 것으로 박테 리오파지뿐 아니라 plasmid DNA 등 여러 종류의 DNA에 의해 형질전환이 될 수 있다.

② 수용세포
competent cell이란 정상적인 박테리아에 화학적 또는 물리적인 처리를 하여 DNA가 잘 들어갈 수 있게 만든 cell이다.
ligation을 마친 DNA나, 원형 plasmid를 증폭하기 위해, 혹은 cloning을 끝내 고 완성된 벡터가 있는데 그것을 expression하기 위해서 E.coli에 형질전환을 해야하는데, 이 때 사용하는 E.coli 숙주세포를 수용세포라고 부른다.

③ 벡터(vector)
벡터란 원하는 유전자 단편을 숙주세포 안으로 안정하게 운반하는 vehicle형태 를 말한다. 벡터의 종류에는 plasmid, becteriophage, cosmid, phagemid등이 있는데 그 중 가장 널리 쓰이는 것은 박테리아에 존재하는 plasmid이다.

참고 자료

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http://blog.naver.com/trial319 Redirect=LoglogNo=60138114749
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미생물학 실험서/한국미생물학회
유전학의이해/Robert H. Tomarin/라이프사이언스
분자생물학노트 제3판/KIST생명공학연구소
http://biochemistry.yonsei.ac.kr
http://www.genehunters.co.kr/training/