HPLC 이론

목차

1. 크로마토그래피
2. HPLC
3. HPLC 기기시스텀의 구성
4. 실험과정
5. 결과

본문내용

◆ 크로마토그래피
혼합물의 시료에서 매질내에서의 이동도 차이를 이용해서 그 성분을 분리, 분석하는방법. 고정상 한 끝에 시료를 흡착시키고 여기에 적당한 용매(이동상)를 흘리면 시료의 성분은 고정상의 내부를 용출과 흡착을 반복하면서 이동한다. 그 동안에 흡착되기 쉬운 것과 어려운 것과의 사이에 이동도의 차이가 생겨서 혼합물의 분리가 가능해진다. 이때 극성이 큰 고정상과 이것보다 극성이 작은 이동상 용매를 조합시킬 경우, 즉 순상크로마토그래피와 이것과는 반대로 이동상보다 극성이 낮은 고정상을 쓰는 경우, 즉 역상크로마토그래피가 있다. 크로마토그래피는 고정상과 시료 간에 작용하는 친화력의 본성에 따라 흡착형, 분배형, 이온교환형으로 분류한다. 고정상으로는 실리카겔, 활성탄, 산화알루미늄이나 이온교환체(이온교환크로마토그래피) 등을 사용한다. 다공질미립자상의 이러한 고정상을 가늘고 긴 원통에 넣어서 사용하는 것이 칼럼크로마토그래피이고 칼럼의 한 끝에 흡착된 물질은 용매와 같이 흡착대를 형성하면서 이동하여 다른 끝에서 분별 용출된다. 용매의 이동을 기계적으로 빠르게 하여 고감도의 검출기로 성분의 신속한 분석을 할 수 있도록 한 것이 고속액체크로마토그래피이다. 여과지크로마토그래피는 여과지 그 자체를 고정상으로 하는 것으로 가늘고 긴 여과지의 한쪽 끝 가까이에 시료를 묻혀서 용매를 그 끝에 스며들게 하면, 각 성분은 여과지 위를 각각 독자적인 위치로 이동하기 때문에 그 이동률 즉Rf값을 측정함으로써 그 동정이 가능해진다. 만약 그 물질을 육안으로 감지할 수 없는 경우는 적당한 발색시약을 사용하든지 자외선조사 등에 의해 검출한다. 박층 크로마토그래피는 이것과 거의 같은 방법으로 분석을 하는 것으로, 유리판 위에 얇고 균일하게 펼친 고정상을 쓴다. 이러한 것들은 이동상이 액체인 액체크로마토그래피이다.

참고 자료

없음