DNA transfection, Lipofetcion
- 최초 등록일
- 2013.03.15
- 최종 저작일
- 2011.04
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목차
1. Object
2. Introduction
3. Material and Apparatus
4. Method
5. Results
6. Discussion
7. Reference
본문내용
Transfection을 통해 원하는 DNA를 293T cell 내로 유입시킨다.
Lipofetcion을 이해하고, transfection efficiency를 높이는 방법을 알아본다.
Introduction
[Transfection]
DNA를 culture 중인 cell 내로 유입시켜 외부 DNA가 세포 내에서 발현되도록 하는 것이 transfection의 목적이다. DNA는 negative charge를 띄는 분자이고 cell membrane 또한 negative charge를 띈다. 따라서 DNA를 cell 속으로, 더구나 핵 속으로 까지 유입 시키는 것은 여러 가지 특별한 agent를 통한 transfection method를 사용해야 하는 까다로운 일이며,
<중 략>
[실험 시 주의사항]
293T cell 은 잘 떨어지기 때문에 주의해서 solution을 넣어 주어야 한다.
Transfection 이후의 과정에도 cell이 떨어지지 않게 주의한다.
suction이나 wash step에서 cell들이 많이 떨어지기 때문에 특별히 주의한다. lipofectamine을 사용하는 실험에서 transfection을 위해 cell을 키울 때, 혹은 transfection 후 antibody는 세포투과성이 높아진 상태이므로, 세포독성을 보일 수 있다. 저해 효과를 나타 낼 수 있으므로 첨가하지 않는 것이 좋다.
<중 략>
바이러스에 따라서는 genome만 넣어주어도 증식하여 새끼 바이러스를 생산하는 경우가 있다. 이와 같이 viral genome만이 숙주 세포에 들어가 증식하는 현상을 트랜스펙션 (transfection)이라고 부르며, transfection 결과 증식하여 자손을 생산하는 바이러스의 genome을 감염성이 있는 genome (infectious genome)이라고 부른다. transfection은 infection에 비하여 그 감염의 효율이 매우 낮은 편이긴 하지만, infection에서처럼 숙주세포의 종류에 제한을 크게 받지 않는 다는 장점도 있다.
참고 자료
http://www.invitrogen.com/site/us/en/home.html
KDR학술지원센터; http://blog.naver.com/soni0330?Redirect=Log&logNo=120140039337
생물공학; 고정삼, 고영환, 김진현, 오남순, 인만진 저| 유한문화사 | 2009.08.10.
Nanobiotechnology of Biomimetic Membranes; Martin, Donald (Edt) 저| Springer Verlag | 2006.11.01.
줄기세포의 분석.조작.유전자 트랜스펙션을 위한 마이크로유체 셀 프로세서의 개발; 김학성 KISTI
