[레포트] 실험 생화학 (단백질 분리법 및 정량법)

소개글

실험 생화학 시간에 제출한 레포트입니다. 비교적 단순한 단백질 분리법, 단백질 정량법을 보기좋게 정리한 것입니다.

목차

1. 단백질 정량법
1) SDS 폴리아크릴아마이드 젤 전기영동 (SDS-PAGE)
2) Isoelectric focusing

2. 단백질 정량법
1) BCA법(Bicinchoninic Acid Assay)
2) kjeldahl법
3) Lowry법
4) 전기영동법
5) bradford법
6) Coomassie blue법

본문내용

1) SDS 폴리아크릴아마이드 젤 전기영동 (SDS-PAGE)
이 방법은 단백질이 단위체인지 아니면 소중합체인지를 결정할 때와, 소중합체를 구성하는 소단위체들의 수와 크기를 결정할 때 유용하게 사용된다.
SDS는 단백질과 결합하여 단백질의 규칙적인 삼차구조를 파괴하여 불규칙하고 무작정한 코일 구조를 가지게 한다. 만일 단백질이 소중합체일 경우에는 구성 소단위체들로 해리시킨 후 불규칙한 코일 구조를 가지게 한다. SDS는 강한 음전하를 띄고 있으며 단백질과 일정한 비율로 결합하는 성질을 가지고 있어 SDS-단백질 복합체는 질량에 대한 전하의 비가 일정하게 된다.

< 중 략 >

2. kjeldahl법

질소 정량법의 하나. 단백질 등 유기화합물 중의 질소를 진한 황산과 가열하여 암모니아로 바꾸어, 이것을 약산용액에 흡수시킨 후 적정에 의해 정량하는 방법. J. Kjeldahl이 곡물 중의 단백질을 황산으로 습식 분해하여 측정한 방법으로 1883년에 보고한 이래 여러 가지 다양한 개량법이 개발되었으며, 단백질뿐만 아니라 거의 모든 유기물 중의 질소정량법으로 이용된다. 분해촉진과 질소의 완전 암모니아화의 목적으로 황산칼륨 등의 염류(가열온도상승의 효과)와 수은, 동 등의 염을 소량을 가하여 황산에 의해 유기물을 분해하고 이어서 알칼리성으로 만들어 유리하는 암모니아를 증류하여 산 표준액에 포집하여 알칼리액으로 적정하든가 붕산용액에 포집 후 산 표준액으로 적정하지만, 후자 방법이 바람직하다. 분해 촉진제로 수은을 쓸 때 가장 신속하고 효과적이지만 환경 문제가 있기 때문에 산화 티타늄, 산화 바나듐, 산화 지르코늄 등으로 대체하는 방법이 사용된다. 식품 중의 질산태질소는 분해초기에 부분적으로 휘발하고 회수가 불확실하여 오차가 생기기 때문에 전 질소정량을 목적으로 할 때 salicylic acid로 포착하고 나서 분해한다.

참고 자료

없음