[서강대학교 현대생물학 실험레포트] 면역세포의 분리 및 분석
- 최초 등록일
- 2013.01.03
- 최종 저작일
- 2013.01
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소개글
면역세포의 분리 및 분석에 대한 서강대학교 현대생물학 실험레포트입니다.
목차
1. Abstract
2. Introduction
3. Materials & methods
4. Results
5. Discussion
6. References
본문내용
Abstract
이번 실험은 쥐로부터 면역세포를 분리하여 FACS를 이용하여 분석하는 것이었다. 실험에서 면역세포를 분리해낸 면역기관은 1차 면역기관인 thymus(T cell이 생성되는 곳)와 2차 면역기관인 spleen이었는데, 그 외에 1차 면역기관으로 B cell이 생성되는 bone marrow와 2차 면역기관으로 lymph node가 있다. T cell은 항체를 생산하는 B cell에 작용하여 항체를 만들도록 하며, 대식세포에 작용하여 대식세포를 활성화시키며 cytotoxic T cell를 활성화시키기도 한다. 이와 같이 면역반응의 조절에 관여하는 T cell을 helper T cell이라고 한다. FACS (Fluorescece Activated Cell Sorter)는 flow cytometry의 한 기법으로서 세포를 적당한 형광물질로 표지한 후 가는 관을 통해 흘리면서 형광유무 및 강도에 따라 세포를 분류 또는 숫자를 세어주는 장치이다. 각 유형의 세포들은 세포표면에 서로 다른 표면단백질을 가지고 있기 때문에 이에 대한 항체를 이용하여 세포를 구분한다. 실험 방법은 경추 분리를 통하여 쥐를 희생시키고 thymus와 spleen을 분리한 후 으깨어 면역세포를 분리하고 antibody를 처리하여 반응시킨 다음 FACS를 이용하여 staining pattern을 분석하여 thymus, spleen내의 면역세포 비율을 분석한다. 그 결과 spleen내에서 B cell : T cell 은 53.88% : 39.46% (<Figure 3>), thymus내에서 CD4 cell : CD8 cell 은 6.06% : 1.48%인데 반해 double negative를 띠는 cell이 91.73% (<Figure 4>)로 thymus내에는 대부분 undifferentiated immune cell 형태로 존재함을 알 수 있었다. FACS이전에 cell을 확실하게 vortexing하여야 막히지 않고 정상적으로 진행될 수 있다.
참고 자료
Peter Parham(김선영 역), 면역학(2nd ed.), 라이프사이언스, 2006, pp.14-15, pp.67-71
Susan R. Barnum, Biotechnology(2nd ed.), Thomson, 2005, pp.221-222