실험5.DNA sequencing
- 최초 등록일
- 2012.12.08
- 최종 저작일
- 2012.11
- 2페이지/ 한컴오피스
- 가격 1,000원
소개글
열심히 쓴 자료입니다^^*
목차
1.실험목적
2. 실험과정
3. 실험결과
4. 고찰
본문내용
1.실험목적 특이적인 16S rRNA 유전자 염기서열에 대한 primer를 이용하여 PCR로 증폭하고, 증폭산물을 sequencing한 서열과 이미 알려져 있는 미생물 서열을 비교함으로써 균종을 동정할 수 있다.
2. 실험과정
(1) DNA 추출
PCR 전에 생물의 DNA 샘플이 필요하므로 추출하는 과정이 필요하지만, 세균의 경우 이 단계를 생략하고 PCR 과정의 step1 과정의 시간을 늘리면 원하는 DNA 지역의 샘플만을 PCR 할 수 있다.
원하는 세균의 콜러니를 피펫의 팁으로 일부 따서 멸균수 50를 넣은 tube에 넣고 섞어준다. 그 후 뚜껑을 닫고 vortex라는 기계를 켜고 튜브안의 색이 회색을 띨 때까지 돌린다.
(2) PCR
PCR tube의 벽 측면을 네 부분으로 나눈다. 그 다음에 bac1(primer1)을 2을 한쪽 측면에 넣고 다른 측면에 bac2(primer2)를 bac1(primer1)과 섞이지 않도록 한쪽 측면에 넣고, 아까 (1)에서 희석시켜놓은 DNA tube에서 2를 세 번째 측면에, 마지막으로 증류수를 4 넣고 rack을 탁탁 쳐준다. 그 후 10의 pre-mix를 벽면에 닿지 않게 넣은 후 다시 탁탁 쳐준다. 그 후 vortex를 한 번 더 하고 PCR 머신에 넣는다.
참고 자료
없음