[화학 실험] 단백질정량실험

최초 등록일
2002.11.30
최종 저작일
2002.11
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목차

1. Title
2. Name, Group
3. Date
4. Principle & Purpose
5. Materials
6. Procedure & Observation
7. Result & Discussion
8. Reference

본문내용

1. Title
단백질 정량실험

2. Name, Group

3. Date
2002.09.30 (Mon)

4. Principle & Purpose
Purpose
: 단백질 용액의 배율에 따른 dilution 방법을 익히고, 흡광광도계로 단백질 양을 측정해 본다. Bradford Assay Standard Curve를 완성하고, Unknown reagent의 단백질 양을 찾아낸다.
Principle
: Coomassie Brilliant Blue G-250이 단백질과 결합하여 붉은 색이 푸른색으로 변하고 최대흡수파장이 465nm에서 595nm로 옮겨지는 것을 이용하여 단백질의 농도를 정량하는 방법이다. 이 방법은 2분 안에 측정이 끝나므로 매우 신속한 방법으로 재현성이 높고 감도가 Lowry방법에 비하여 매우 높다. K-, Na-, Mg--, (NH4)2SO4, polyphenol, 환원당 등에 영향을 받지 않으며 4000이상의 펩티드나 단백질은 모두 측정할 수 있다. 비이온성 세척제(Triton X-100), sodium dodecyl sulfate 등에 영향을 받으나 그 양이 0.1%이내이면 무난하다. 석영큐벳과 반응을 하기 때문에 유리 또는 플라스틱의 큐벳을 사용해야 하며 단백질의 종류에 따라 표준검량곡선이 약간 달라질 수 있으므로 검량곡선의 표준물질을 선택하는 것이 매우 중요하다.

참고 자료

없음

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