[DNA추출]DNA추출

최초 등록일
2002.11.25
최종 저작일
2002.11
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소개글

2.실험 방법(material & methods)
1)재료(material)
phenol reagent, proteinkinase를 넣어서 incubation한 백혈구, ROCKER, centrifuge, 스포이드, 95% ETOH, phenol/chloroform, 50mL centrifuge tube, 분석저울, micropipet

목차

1.실험목적
2.실험재료및방법
3.실험결과
4.고찰

본문내용

1.실험 목적(aims)
proteinkinase를 넣어서 incubation한 백혈구를 이용하여 백혈구에 존재하는 DNA를 추출해 내는 방법을 습득한다.

2.실험 방법(material & methods)
1)재료(material)
phenol reagent, proteinkinase를 넣어서 incubation한 백혈구, ROCKER, centrifuge, 스포이드, 95% ETOH, phenol/chloroform, 50mL centrifuge tube, 분석저울, micropipet
2)방법(methods)
(1) phenol reagent를 proteinkinase를 넣어서 incubation한 백혈구와 1:1비율로 tube에 넣는다. 백혈구가 2mL이므로 phenol reagent도 2mL을 넣는다.
(2) ROCKER에 10분간 얹어 놓고 섞는다.
(3) 50mL centrifuge tube에 옮긴다.
(4) centrifugation(14000rpm, 20℃, 10분간)한다.
(5) 단백질이 분해되어서 pellet이 형성되었다. phenol reagent는 단백질을 분해하는 시약이므로 실험과정이 잘못되었다.
(6) pellet만 제외하고 새로운 tube에 상층액을 새 tube에 옮긴다.
(7) 그래서 phenol/chloroform 3mL을 micropipet를 이용해서 넣고 2000rpm에서 5분간 원심 분리하여 DNA만 추출해낸다. DNA가 제대로 추출된 경우 끈적한 액체가 상층을 이룬다.
(8) 스포이드를 이용해서 DNA(상층액)를 새 tube에 옮긴다.
(9) 95% ETOH를 2.5배(5.8mL)를 넣는다.

참고 자료

없음

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