미생물실험법

최초 등록일
2009.08.11
최종 저작일
2008.01
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미생물시험법

목차

1. 시료의 채취법
2. 총균수 측정법
3. 생균수 측정법
4. 표준평판배양의 집락수 계수법
5. SPLC
6. Bactometer system
7. Malthus system
8. Bactoscan
9. 저온세균
10. 내열성균
11. 대장균군
12. 장구균
13. 산생성균의 균수 측정
14. 단백분해균의 균수 측정
15. 지방분해균의 균수 측정

16. 효모 및 곰팡이의 균수 측정
17. 유방염 우유의 세균학적
시험법
18. 혐기성 세균 검사법
19. 병원균 검출법
20. 세균의 염색
21. Bacteriophage 검사법
22. 미생물 동정을 위한 생화학
시험
*. 교재 외 미생물 분석법 소개
- API KIT
- VITEK
- BIOSYS SYSTEM 
- 3M Petrifilm

본문내용

1. 시료 채취
- 충분한 혼합
- duplicate sampling
- 날짜, 시간, 장소, lot 번호 명기
- 샘플 채취 후 5℃ 보관
- 샘플 채취 후 24시간 내 검사
2. 총균수 측정(직접현미경 계수법)
- 세균(생균+사균) 검사
- 정확성 낮으나 신속함
- 1cm2 구획 내에서 관찰 (breed slide 이용)
- sample 고정 ⇒ 지방제거 ⇒ 염색 ⇒ count
- 현미경시야 20군데 이상 count
- 세균덩어리 : 1개로 count
- 세균이외의 다른 세포도 count
☞ 세균계수법 (세균수/ml)
① 현미경시야 넓이 계산(slide micrometer 이용)
② 현미경시야당 평균세균수 = 전체세균 / 현미경 시야수
③ 1cm2 당 현미경시야수 = 1cm2 / 현미경 시야면적
⇒ calculation (cells/ml) = ② x ③ x 100
9. 우유 및 유제품의 미생물학적 시험
9. 우유 및 유제품의 미생물학적 시험
☆희석을 하는 이유
- 균의 수가 너무 많아서 petri dish에서 확인할 수가 없다. 따라서 희석을 하는데30~300 개의 colony를 셀 수 있도록 한다.
희석을 할수록 균의 수가 적어지므로 우리가 눈으로 셀 수 있는 colony가 보인다.
-
3. 생균수 측정
⇒ 희석액 조제
9. 우유 및 유제품의 미생물학적 시험
3. 생균수 측정
⇒ 주입 평판법
☆ 실험시 주의 사항
- 멸균 배지는 온도에 따라 굳거나 녹을 수 있으므로 45~50℃의 항온수조에
- petri dish 뚜껑을 닫고 배지가 뚜껑에 묻지 않도록 주의 / 8자 모양으로 천천히
흔들어 잘 섞어지게 하되 기포가 생겨나게 해서는 안 된다.
- 한천은 25℃이하에서 굳으며, 배지의 표면이 마르면 배양접시를 거꾸로 하여
20℃ 또는 37℃ / 24~48h 배양
9. 우유 및 유제품의 미생물학적 시험
4. 집락수 측정법
① 확산 집락 없이 30~300개의 집락(colony)이 있는 평판을 선택 / 계수
⇒ 희석 배수를 곱하여 시료 중의 균 수 구함
② 연속 희석 단계에서 30~300개 집락이 있는 경우
두 희석 단계 균 수의 비가 두 배 이하인 경우에는 두 개의 산술 평균을 구하고
두 배 이상인 경우에는 적은 쪽의 균 수만을 기록
③ 모든 평판에서 300개 이상의 집락이 발생한 경우
희석배수가 가장 큰 평판의 균을 계수하여 몇 개 이상으로 표시
④ 모든 평판에서 30개 이하의 집락이 발생한 경우
희석배수가 가장 작은 평판의 균을 계수하여 몇 개 이하로 표시
☆ 균수CFU(colony forming unit) / 1ml = n × d
(n: 배지에 나타난 colony수, d: 희석배수)

참고 자료

없음

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