흡광분석법을 이용한 당정량

*유*
최초 등록일
2009.05.12
최종 저작일
2008.10
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소개글

흡광분석법을 이용한 당정량
-DNS Method

목차

Ⅰ. Introduction

ⅰ. Method
⑴ Glucose oxidase법
⑵ DNS법
⑶ Phenol-sulfuric acid법
ⅱ. Goal of experiment

Ⅱ. Material and procedure
ⅰ. Material
ⅱ. procedure
⑴ 시약과의 반응 결과
⑵ 흡광도 측정값
⑶ 회귀분석

Ⅲ. Result and discussion
ⅰ. Result
ⅱ. discussion

본문내용

I. Introduction

ⅰ. Method
식품성분 중에서 환원성을 가진 물질의 대부분은 당질이다.(비환원성의 소당류나 다당류를 산화시키면 환원성의 단당류로 된다.)
따라서 당질은 그 환원성을 이용해서 정량하면 된다. 즉 환원당은 알칼리성의 조건에서 중금속염과 가열하면 정량적으로 그 중금속을 환원하므로, 환원된 중금속을 정량하여 그 결과로부터 당량을 산출한다.
이 색소를 이용하여 비색 정량하는 방법으로 조작이 간단하고, 신속히 할 수 있기 때문에 많은 시료를 일시에 정량 할 수 있다.

※ 환원당이란?
-알칼리성에서 3,5-Dinitrosalicylic acid의 NO₂기를 NH₂기로 환원 시켜 적갈색을 띠게 한다. 포도당, 과당, 말토오스 등이 포함되며, 설탕으로의 환원력은 없다. 아미노산과 화학반응을 일으켜 갈색물질을 쉽게 만들며 식품이 갈변하는 원인이 된다.

⑴ Glucose oxidase법
이 방법은 주로 소화율을 확인할 때 많이 쓰인다. Glucose는 glucose의 작용에 의해 α형에서 β형으로 빨리 변하며, 산화되어 gluconic acid와 H₂O₂가 생성된다. 이 생성된 H₂O₂는 peroxidase의 작용에 의해 4-aminoantipyrine과 phenol을 산화 축합시켜 적색의 quinone을 생성한다. 이 생성된 quinone 색소의 흡광도를 505nm에서 측정한다. 이 정량 법은 끓이는 조작 없이 one step법으로써 발색이 안정하고, 미량의 샘플로 정량이 가능한 간편한 법이다.

⑵ DNS법
575nm에서 흡광도를 측정하여 sucrose 또는 maltose로 구한 표준곡선을 이용하여 정량 분석한다. DNS법은 방법이 간단하여 많이 사용하지만 산화 정도가 생성된 dextrin의 사슬 길이에 따르기 때문에 효소 활성이나 환원당의 양이 과대평가 될 수 있는 문제점이 있다. 다시 말하면 DNS법은 당의 환원성 말단에 반응을 일으켜

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