[인천대 생명공학실험3 A+] 미생물 배양 및 단백질 생산 실험결과 보고서 [Inducer(IPTG, lactose) 및 lac operon, T7polymerase, BL21(DE3)pLysS,pET23]
- 최초 등록일
- 2020.03.08
- 최종 저작일
- 2019.09
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소개글
A+를 쉽게 받을 수 있도록 매우 정리가 잘 되어 있는 미생물 배양 및 단백질 생산 실험결과 보고서 입니다.
OD600에서 흡광도 0.6-0.8값 및 cell growth curve, Beer-Lamber low 및 흡광도를 정확하게 측정하는 법, Inducer(IPTG, lactose) 및 lac operon의 발현, T7polymerase와 E.coli BL21(DE3)pLysS,pET23, LB 및 LA 배지, 전배양 및 본배양에 대한 이론을 포함하고 있습니다.
이론 외에 실험결과와 오차의 원인까지 포함한 고찰 및 결론 또한 체계적으로 꼼꼼히 적혀있습니다.
목차
1. Date
2. Title
3. Purpose
4. Principle
5. Materials & Methods
6. Result
7. Discussion
8. Conclusion
9. Reference
본문내용
3.Purpose
전배양 후 본배양 한 E.coliBL21(DE3)를 OD600 0.6-0.8에서 흡광도를 측정하고(0시간), 이때 단백질 발현 inducer인 IPTG를 넣어준뒤 1시간마다(1-4시간)OD600에서 흡광도 를 측정하여 cell growth curve를 그린다. 시간마다 펠렛의 양과 색 변화를 확인하 며 각 샘플과 남은 샘플의 펠렛은 냉동보관하여 다음 실험의 SDS page와 His-taq purification에 이용한다.
<중 략>
5.Materials&Methods
Materials
E.coliBL21(DE3),1000XAmpicillin50uLinaE-tube,LB 배지 50mLin500mL 삼 각플라스크,1000XAmpicillin50uLinaE-tube,0.5M1000XIPTG50uL,5개 E-tube,50mL conical tube 1개,Rack 1개,5 mL LA in 15 mL conical tube (전배양),1 mL, 200 uL pipette과 팁,팁 버리는 통,일회용 cuvette 한 개, 진탕배양기,고속원심분리기,UVspectroscopy
참고 자료
Joanneetal., 미생물학(2016), 라이프사이언스,p512 JAMESG.etal.,Microbiologyalaboratorymanual6th,PEARSONp.215-218,134-135
DeanR.etal., 생화학 개념과 응용(2017), 라이프사이언스,p204,205