Detection of Mitochondrial Reactive Oxygen Species in Living Rat Trigeminal Caudal Neurons

저작시기 2015.06 |등록일 2016.04.02 파일확장자어도비 PDF (pdf) | 7페이지 | 가격 4,000원
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서지정보

발행기관 : 대한구강생물학회 수록지정보 : International Journal of Oral Biology / 40권 / 2호
저자명 : Hae In Lee, Sang Woo Chun

목차

서 론
재료 및 방법
결 과
고 찰
감사의 글
Conflict of interest
References

영어 초록

Growing evidence suggests that mitochondrial reactive oxygen species (ROS) are involved in various pain states. This study was performed to investigate whether ROS-induced changes in neuronal excitability in trigeminal subnucleus caudalis are related to ROS generation in mitochondria. Confocal scanning laser microscopy was used to measure ROS-induced fluorescence intensity in live rat trigeminal caudalis slices. The ROS level increased during the perfusion of malate, a mitochondrial substrate, after loading of 2′,7′-dichlorofluorescin diacetate (H2DCF-DA), an indicator of the intracellular ROS; the ROS level recovered to the control condition after washout. When pre-treated with phenyl N-tert-butylnitrone (PBN) and 4-hydroxy-2,2,6,6-tetramethylpiperidene-1-oxyl (TEMPOL), malate-induced increase of ROS level was suppressed. To identify the direct relation between elevated ROS levels and mitochondria, we applied the malate after double-loading of H2DCF-DA and chloromethyl-X-rosamine (CMXRos; MitoTracker Red), which is a mitochondria- specific fluorescent probe. As a result, increase of both intracellular ROS and mitochondrial ROS were observed simultaneously. This study demonstrated that elevated ROS in trigeminal subnucleus caudalis neuron can be induced through mitochondrial-ROS pathway, primarily by the leakage of ROS from the mitochondrial electron transport chain.

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