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Western blot 실험 방법2025.05.101. Western blotting Western blotting (immunoblotting)은 샘플 내 특정 단백질의 존재 여부, 양, 크기를 측정하는 실험이다. 단백질이 소량이어도 검출 가능하고, 다양한 종류의 단백질이 혼합된 시료를 검사할 때도 항체의 기질 특이성 덕분에 원하는 단백질만 검출할 수 있다는 장점이 있다. 2. Western blot 실험 순서 Western blot 실험은 크게 5개의 순서로 이루어진다. 1) SDS-PAGE를 시행하여 단백질을 크기별로 분리, 2) 분리된 단백질을 membrane에 전이, 3)...2025.05.10
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계대배양 실험 결과 보고서2025.01.131. 계대배양 실험 이번 실험을 통해 HeLa cell의 배지 조성 방법과 시약들의 용도를 알 수 있었고, 마이크로 피펫과 파이펫에이드 사용법을 익힐 수 있었습니다. 세포가 오염되지 않도록 클린벤치에 들어가는 모든 물품을 소독하고, 배지 및 시약의 뚜껑과 병의 입구, 배양 접시의 뚜껑을 열고 닫을 때 화염멸균을 하는 등 실험 과정에서 주의해야 할 점들을 배울 수 있었습니다. 실험 중 파이펫에이드 사용 시 거품이 생기는 문제가 있었지만, 이를 해결하는 방법을 찾아 개선할 수 있었습니다. 2. 세포 배양 세포 배양 실험에서는 부착성 세...2025.01.13
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미생물 배양 배지 제조 및 E.coli 접종 실험 보고서2025.05.071. 미생물 배양 배지 제조 실험에서는 미생물 배양에 기본이 되는 LB 배지를 제조하는 과정을 설명하고 있습니다. LB 배지는 tryptone, yeast extract, NaCl, agar로 구성되며, tryptone은 아미노산과 펩타이드를 공급하고, yeast extract는 질소, 당, 무기/유기물을 제공하며, NaCl은 세포 내 이온 신호전달과 삼투압 조절에 필요합니다. Agar는 고체 배지를 만드는 데 사용됩니다. 또한 R2A 배지, YM 배지, NB 배지, TBS 배지 등 다양한 종류의 배지와 그 특성에 대해서도 설명하고...2025.05.07
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[생물공정실험] 3주차 Gene expression analysis by RT-PCR 예비보고서2025.04.261. cDNA 정의 및 합성 방법 cDNA(complementary DNA)는 RNA를 주형으로 역전사효소와 DNA 중합효소에 의해 합성된 DNA입니다. 역전사효소를 이용한 cDNA 합성에서는 RNA와 annealing 위치에 따라 3종류의 primer를 사용할 수 있습니다. (1) 역전사 효소 (reverse transcriptase; RTase), (2) RT반응에 사용하는 primer (oligo dT primer, random primer, gene-specific primer). 2. Downstream applicatio...2025.04.26
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Urine culture2025.01.291. Urine analysis (UA) 요로 감염을 파악하고 관리하기 위해 소변 속 당, 단백질의 유무를 확인하여 신장 질환 및 당뇨병 등을 관리하는 검사입니다. 자연배뇨 시 드레싱 세트를 사용하여 무균적으로 소변을 채취하고, Foley catheter 삽입 중인 경우 소독솜으로 소변 배출구를 닦아 소변을 채취합니다. 검사 결과에는 요산도, 요단백, 요당, 요케톤체, 요빌리루빈, 요유로빌리노겐, 요비중, 요적혈구, 요백혈구 등이 포함됩니다. 2. Urine culture 소변에 박테리아 등 세균의 유무를 파악하고 관리하기 위한 검...2025.01.29
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분자생물학 실험 (A+) DNA ligation and transformation 예비보고서2025.01.041. DNA ligation DNA ligation은 DNA 단편을 연결하는 과정으로, 제한효소로 절단된 DNA 단편을 연결하여 재조합 DNA를 만드는 데 사용됩니다. 이 과정에서 DNA ligase 효소가 사용되며, 이를 통해 DNA 단편의 인접한 3' 수산기와 5' 인산기 사이의 공유 결합이 형성됩니다. DNA ligation은 유전자 클로닝, 유전자 조작, 유전체 연구 등 다양한 분자생물학 실험에서 중요한 기술입니다. 2. DNA transformation DNA transformation은 외부 DNA를 세포 내로 도입하는 ...2025.01.04
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Cell harvest and protein assay2025.01.231. Cell harvest 세포 배양 시 adherent cell과 suspension cell로 구분할 수 있으며, adherent cell을 harvest하는 방법에는 화학적 방법(trypsin, accutase 사용)과 물리적 방법(scraper 사용)이 있다. 이번 실험에서는 물리적 방법인 scraper를 사용하여 adherent cell을 harvest하였다. 2. Protein extraction 세포 내 단백질을 추출하기 위해 lysis buffer와 phosphatase/protease inhibitor를 사용하여 ...2025.01.23
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11주차_sequencing BL21 transformation2025.05.141. Sanger sequencing Sanger sequencing은 Frederick Sanger에 의해 1977년 개발된 방법으로, 500bp 이하의 DNA 서열을 결정할 때 99.99%의 매우 높은 정확도를 보인다. 이 방법은 DNA polymerase에 의한 DNA 중합 과정 중 template DNA 서열과 상보적인 염기가 결합된다는 성질을 이용하기 때문에 chain termination method 또는 dideoxynucleotide termination method라고 부르기도 한다. Sanger sequencing...2025.05.14
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이화여대 생명과학실험 A+ 리포트(DNA plasmid transfection, Immunoprecipitation)2025.01.231. DNA plasmid transfection DNA plasmid transfection 실험의 목적은 고분자-유전자 복합체를 이용하여 동물 세포에 plasmid DNA를 넣어 세포의 형질을 전환하는 것이다. 이를 위해 먼저 단백질 A에 대한 염기서열 옆에 epitope tag인 V5 폴리펩타이드에 대한 염기서열을 같이 붙여서 플라스미드 DNA를 세포 내에 넣어준다. 그러면 플라스미드가 핵내에 들어가서 DNA 역할을 할 수 있고, 이후 벡터 DNA가 mRNA로 전사되어 V5가 붙은 단백질 A가 발현된다. 2. Immunopre...2025.01.23
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신생아실 사용기구 조사 보고서2025.01.091. 보육기(incubator) 보육기는 미처 성장을 마치지 못하고 세상으로 나온 미숙아나, 출생 시 면역체계 등에 문제가 있는 신생아들이 충분히 성장하거나 병원균에 대항할 면역체계를 키울 때까지 인공적으로 아이를 성장시키는 기계입니다. 체온을 36~37℃로 유지하기 위해 아기의 체중, 출생 일수, 재태 기간 등을 고려해 온도를 설정하고, 습도발생탱크에 증류수를 채워 적정 습도를 유지합니다. 2. 개방형 보육기 개방형 보육기는 체온조절 센서가 있어 체온유지를 시켜주며 인큐베이터와 거의 같지만, 인큐베이터에 들어갈 조건이라도 아기 상...2025.01.09
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