소개글

분자생물학 분자 유전학에 대한 내용입니다.

목차

I. Introduction
1. Plasmid의 특징
2. Plasmid DNA 분리의 원리
3. Plasmid 분리에 사용하는 시약
Ⅴ. Discussion

본문내용

I. Introduction
1. Plasmid의 특징
Plasmid는 박테리아 세포 내에 독립적으로 존재하는 환형의 DNA 분자이다. 이들은 대부분 하나 이상의 유전자를 가지고 있으며, 이들 유전자는 종종 숙주세균에 의해 보여지는 유용한 특징을 담당하고 있다. 예를 들어 항생제의 정상적인 독성농도에서 생존하는 능력은 항생제 저항성 유전자를 가진 plasmid가 세균 내에 존재하기 때문이다. 실험실에서 이러한 항생제 저항성은 종종 선별표지(Selection marker)로 이용된다. 모든 plasmid는 복제 개시점(origin of replication)이 될 수 있는 최소한 한 개의 DNA 염기서열을 갖고 있어서 세포 내에서 세균의 염색체와는 독립적으로 복제할 수 있다. 어떤 plasmid는 세균의 염색체 속으로 자신을 삽입시켜 복제한다. 이러한 plasmid (episome)들은 수많은 세포분열 동안 그 염색체 속에서 그 형태기 안정적으로 다음 세대로 유전된다. Plasmid의 크기는 1kb∼250kb 이상까지 다양하다.
복제개수(copy number)란 하나의 세균세포 내에 존재하는 각각의 plasmid의 갯수이다(1개∼500개 이상). 좋은 클로닝 운반체가 될려면 복제개수가 많은 것이 좋다.
2. Plasmid DNA 분리의 원리
주로 miniprep이라고 부르는 이 방법은 plasmid DNA를 소량 분리하는 방법이다. 아래의 방법은 가장 보편적으로 사용되는 방법인 Alkali lysis method이다.
기본적인 원리는 그림에서 보듯이 세균의 cell wall과 cell membrane을 부수고 DNA 만을 분리하는 것이다.

참고 자료

없음