단백질 정량법

소개글

1. 단백질 정량
: 단백질 정량이란 시료 내에 포함된 단백질의 양, 또는 농도를 구하는 과정으로써, 대부분의 생화학실험의 기본이 되는 과정이라고 할 수 있다. 생물학 분야의 경우 다른 분야보다 결과를 볼 때까지 뭔가 잘못되었다는 것을 알기 어려워, 준비 단계에서의 단백질 정량이 잘 못 이루어지면 헛수고를 하거나 잘못된 결과를 얻을 수 있다. 이러한 이유 때문에, 단백질 정량을 정확하게 하는 것은 매우 중요하다. 또한, 정확성뿐만 아니라, 대부분의 실험에서 반복적으로 사용하게 되므로, 간편성 역시 중요하게 여겨지기 때문에, 실험에 따라서 다양한 단백질 정량 방법이 사용되고 있다. 하지만 모든 종류의 단백질의 농도를 결정할 수 있는 완벽한 방법은 지금까지 알려져 있지 않다. 따라서 단백질의 양을 정량하기 위해서는 단백질의 본질, 단백질 시료에 있는 다른 성분들의 본질, 정량분석의 신속도, 및 정밀도 등에 따라서 적당한 방법을 선택하여야 한다.

목차

1. 단백질 정량

2. 단백질 정량법
1) UV법(분광학적 정량법, UV-vis Spectrophotometry)
2) Bradford법
3) Lowery법
4) Bicinchoninc Acid(BCA) Assay
5) 뷰렛법
6) Kjeldahl법

✽참고문헌

본문내용

1. 단백질 정량
: 단백질 정량이란 시료 내에 포함된 단백질의 양, 또는 농도를 구하는 과정으로써, 대부분의 생화학실험의 기본이 되는 과정이라고 할 수 있다. 생물학 분야의 경우 다른 분야보다 결과를 볼 때까지 뭔가 잘못되었다는 것을 알기 어려워, 준비 단계에서의 단백질 정량이 잘 못 이루어지면 헛수고를 하거나 잘못된 결과를 얻을 수 있다. 이러한 이유 때문에, 단백질 정량을 정확하게 하는 것은 매우 중요하다. 또한, 정확성뿐만 아니라, 대부분의 실험에서 반복적으로 사용하게 되므로, 간편성 역시 중요하게 여겨지기 때문에, 실험에 따라서 다양한 단백질 정량 방법이 사용되고 있다. 하지만 모든 종류의 단백질의 농도를 결정할 수 있는 완벽한 방법은 지금까지 알려져 있지 않다. 따라서 단백질의 양을 정량하기 위해서는 단백질의 본질, 단백질 시료에 있는 다른 성분들의 본질, 정량분석의 신속도, 및 정밀도 등에 따라서 적당한 방법을 선택하여야 한다.

2. 단백질 정량법
1) UV법(분광학적 정량법, UV-vis Spectrophotometry)
UV법은 단순히 단백질용액의 흡광도를 분광 광도계로 측정하는 방법이다. 단백질에서 아로마틱링을 가지고 있는 아미노산은 티로신, 페닐알라닌 및 트립토판 잔기들은 각각 275nm와 280nm의 자외선을 흡수한다. 많은 단백질들에 있어서의 이 아미노산들의 합친 수준은 거의 일정하므로 단백질의 농도는 280nm에서의 흡광도와 비례하게 된다. 순수한 단백질의 경우, 단백질의 농도가 1mg/ml이고 자외선이 통과하는 경로가 1cm일 때 280nm에서의 흡광도는 1.0이다. 따라서 대부분의 순수한 단백질의 농도는 280nm에서의 흡광도를 측정함으로써 신속히 결정할 수 있다. 하지만 대부분의 단백질의 흡광도는 1mg/ml시료에 대하여 0.4~1.5정도이며 아로마틱 잔기의 조성이 높은 라이소자임은 2.65, 티로신이나 트립토판이 거의 없는 pravalbumin은 0.0의 값을 갖는다. 원하는 단백질의 흡광도를 알면 시료의 농도를 측정하는데 이에는 람버트-비어의 법칙이 적용된다.

참고 자료

http://blog.naver.com/rarorilove?Redirect=Log&logNo=30036524989
http://cafe.naver.com/malmal233.cafe?iframe_url=/ArticleRead.nhn%3Farticleid=359