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DNA 형질전환 보고서

*연*
최초 등록일
2008.12.08
최종 저작일
2007.05
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소개글

예비보고서로 아주 적합하며
DNA 형질전환에 대한 모든 자료를 정리 및 해석해 논 보고서입니다.

목차

서론
재료 및 방법
결과
결론

본문내용

A. Plate의 제조
Plate는 박테리아가 자랄 수 있는 최적의 환경이어야 한다. 박테리아는 plate 상에서 자라 colony를 형성하는데, 한 개의 colony는 한개의 clone으로부터 자란 것이므로 이를 분획하여 여러 실험에 사용할 수 있게 된다. Plate의 조성은 배양시 사용하는 액체 배지(media)의 조성에 agar를 첨가한 것이다. 이때 첨가하는 agar의 농도는 1.5%이며, top agar와 같은 특수한 용도로 사용하기 위해서는 agar의 농도를 변화시키기도 한다.
실험방법
1. Plate를 만들고자 하는 배지를 만든다. 각 배지의 조성은 다음과 같다.
1) LB 배지 (Luria-Bertani medium) 1 liter
실험실에서 가장 흔히 사용되는 배지이다. 위 성분 950 ml의 증류수에 녹인 후 pH를 7로 맞추기 위해 5 N NaOH를 첨가(약 200 ml)하고 증류수로 1 liter로 채운다음 autoclave한다.

2) SOB 배지1 liter
Fresh fronzen 방법으로 competent cell 제조시에 사용하는 배지이다. 950 ml의 증류수에 녹인 후 250 mM KCl 10 ml를 첨가하고 5 N NaOH를 이용하여 pH를 7로 맞춘 다음 증류수로 1 liter까지 채우고 autoclave한다. 사용하기 직전에 멸균한 2 M MgCl2를 최종농도 20 mM이 되도록 첨가하여 사용한다.

3) M9 Minimal 배지 1 liter
M13 phage의 cloning 시에 사용할 수 있다. M9 plate를 제조하는경우는 agar 첨가 후 멸균한 배지가 적당히 식었을 때 다음과 같은 것들을 넣어준 다음 plate를 만들어야 한다.

참고 자료

참고 문헌
A. Stein,a Y. Dalal, and T. J. Fleury. 2002 December 1. Circle ligation of in vitro assembled chromatin indicates a highly flexible structure. 30(23): 5103–5109
J Heighway and M F Santibanez-Koref, 1989 September 12, Unexpected effects on bacterial phenotype induced by expression of a tumour-amplified human sequence 17(17): 6893–6901
DAVID A. MICKLOS GREG A. FREYER, DNA Science a first course, second edition, COLD SPRING HARBOR LABORATORY PRESS
Purves Sadava Orians Heller, Life The Science of Biology Sixth Edition, W.H.Freeman and Company
http://www.ambl.msl.ubc.ca/exp2.html
http://kin.naver.com/db/detail.php?dlid=11&dri_id=110205&eid=Yo1VLE5RQQPEPDrgw888tkd7ehnzF7q2
http://www.pubmedcentral.com/articlerender.fcgi?artid=265577
*연*
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