DNA 형질전환 보고서
- 최초 등록일
- 2008.12.08
- 최종 저작일
- 2007.05
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소개글
예비보고서로 아주 적합하며
DNA 형질전환에 대한 모든 자료를 정리 및 해석해 논 보고서입니다.
목차
서론
재료 및 방법
결과
결론
본문내용
A. Plate의 제조
Plate는 박테리아가 자랄 수 있는 최적의 환경이어야 한다. 박테리아는 plate 상에서 자라 colony를 형성하는데, 한 개의 colony는 한개의 clone으로부터 자란 것이므로 이를 분획하여 여러 실험에 사용할 수 있게 된다. Plate의 조성은 배양시 사용하는 액체 배지(media)의 조성에 agar를 첨가한 것이다. 이때 첨가하는 agar의 농도는 1.5%이며, top agar와 같은 특수한 용도로 사용하기 위해서는 agar의 농도를 변화시키기도 한다.
실험방법
1. Plate를 만들고자 하는 배지를 만든다. 각 배지의 조성은 다음과 같다.
1) LB 배지 (Luria-Bertani medium) 1 liter
실험실에서 가장 흔히 사용되는 배지이다. 위 성분 950 ml의 증류수에 녹인 후 pH를 7로 맞추기 위해 5 N NaOH를 첨가(약 200 ml)하고 증류수로 1 liter로 채운다음 autoclave한다.
2) SOB 배지1 liter
Fresh fronzen 방법으로 competent cell 제조시에 사용하는 배지이다. 950 ml의 증류수에 녹인 후 250 mM KCl 10 ml를 첨가하고 5 N NaOH를 이용하여 pH를 7로 맞춘 다음 증류수로 1 liter까지 채우고 autoclave한다. 사용하기 직전에 멸균한 2 M MgCl2를 최종농도 20 mM이 되도록 첨가하여 사용한다.
3) M9 Minimal 배지 1 liter
M13 phage의 cloning 시에 사용할 수 있다. M9 plate를 제조하는경우는 agar 첨가 후 멸균한 배지가 적당히 식었을 때 다음과 같은 것들을 넣어준 다음 plate를 만들어야 한다.
참고 자료
참고 문헌
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