미생물학 실험보고서-세균의 생장곡선 (Growth Curve)

소개글

미생물학 실험보고서-세균의 생장곡선 (Growth Curve)
미생물의 성장은 4단계를 거친다. Lag phase, Exponential phase, Stationary phase, Death
이를 흡광도를 이용해 측정하여 본다.

목차

1. 일 시
4. 제 목
5. 목 적
6. 준비물
7. 방 법

본문내용

4. 제 목
세균의 생장곡선 (Growth Curve)
5. 목 적 미생물의 성장과 분열과정을 이해한다.
미생물의 성장은 4단계를 거친다. Lag phase, Exponential phase, Stationary phase, Death phase.
6. 준비물
균주 (E.coli), LB broth, 5ml tube, 생리식염수, micropipette, micropipette tip, spectrophotometer, 큐벳, 스퀴즈 바틀, 알콜램프, shaking incubator, 휴지
7. 방 법
1) 15시간 이상 배양 한 E.coli를 10-4배 희석하여 준비한다.
2) 멸균된 상태의 배지 10ml에 준비된 E.coli 배양액을 1ml 접종하여 키운다.
(37℃ shaming incubator에서 약 200rpm)
3) 접종후 4시간 동안 0 time을 포함하여 매 30분마다 시료 100ul에 LB broth 100ul를 첨가하여 큐벳에 넣고 흡광도를 측정한다. (희석배율은 OD 값을 보고 정정할 수 있다.)
이후 같은 희석배율로 OD 값을 측정한다.
4) 흡광도는 600nm에서 측정하고, 0 time에서의 OD (Optical Density) 는 0.08-0.1로 시작하는 것이 적당하다.
5) 배양시간에 따른 흡광도의 변화를 그래프용지를 사용하여 그려보고, 이로부터 Exponential phase 에서의 Generation time을 간접적으로 구해본다.
(Generation time = 흡광도의 변화가 2배가 될 때까지 걸리는 시간)
6) A600 = 1.0 => 8 X 108 cell/ml 이 공식을 가지고, 시간별 대략적인 cell 수를 계산해본다. 8. 결 과 측정시간
측정값
5:30
0.947
6:00
① Generation time 구하기.
분열 또는 출아에 의해서 생긴 새로운 세포가 생장해서 또다시 2개로 분열 또는 출아할 때까지 소 요되는 시간을 말하며,

참고 자료

http://biopedia.org/index.php/Measuring_microbial_growth
대학 미생물학 . 탐구당. 민경희 외역. 2000
미생물 과학. 도서출판 효일. 민봉희