[전기영동] SDS-PAGE (단백질 분자량 측정)

소개글

standard protein 용액을 통해 미지의 단백질 분자량을 결정한다

목차

I. 실험 목적
II. 실험 원리
A. 이론
B. 원리
III. 실험 재료, 시약 및 기구
IV. 실험 방법
V. 실험 결과 및 고찰
A. 결과
B. 고찰
VI. 참고문헌


- 그림 차례 -
[그림 1] 약염기성 전리기와 약산성 전리기 모두 전리도가 크게 변하는 것은
pK±2의 pH에서, pH=pK에서 전리도는 50% (α=0.5) 이다.
[그림 2] Amino acid, 단백질의 전하와 pH의 관계를 각각의 분자에 있는 기의 전리도가
[그림 1]에서 주어진 대로 계산된 예
[그림 3] SDS의 구조
[그림 4] 2-Mercaptoethanol의 구조
[그림 5] 전기영동중의 단백조
[그림 6] Gel의 농도(%T)와 marker 단백질의 이동도
[그림 7] Marker와 단백질의 분자량과 이동도
[그림 8] 전기영동 결과 사진
[그림 9] 결과로 본 단백질 분자량에 따른 이동 거리

본문내용

I. I. I. 실험 목적
전하를 띤 입자가 움직일 때 분자량이 큰 것은 비교적 적게, 분자량이 작은 것은 비교적 많이 이동하는 성질을 이용하여 standard protein 용액을 통해 미지의 단백질 분자량을 결정한다(실험일: 2008년 3월 31일 월요일, 4월 7일 월요일).


II. 실험 원리
A. 이론
1. 전기영동이란?
전기영동은 전장 내에서 전하를 띤 입자들의 움직임이다. 용액에 전압을 걸면 이동)을 전기영동이라고 한다.
전압의 차이가 용액에 함유된 ion 등의 전기를 띤 입자가 움직이는 것(음전하를 띤 입자는 양극(anode)을 향해 이동하고 양전하를 띤 입자는 음극(cathode)으로 전기영동의 임상적인 응용은 주로 단백질이나 단백질과 연관된 물질 EH는 유사한 성질을 가진 물질이 대상이 된다. 단백질은 그 1차 구조가 amino acid로 구성되어 양극성(amphoteric)을 나타낸다. 따라서 단백질은 전하를 띨 수 있는 2개의 말단인 acetic carboxyl group과 basic amino group을 가지고 있다.

단백질의 1차 구조는 하나의 amino acid에 있는 acetic carboxyl기와 다른 amino acid의 basic amino기에서 하나의 물 분자가 빠지면 서로 peptide 결합을 하여 긴 사슬로 연결된 polypeptides, polypeptide chain을 형성한다. 같은 수의 양전하와 음전하를 가지고 있는 단백질의 순전하(net charge)는 전기적으로 중성이므로 이런 단백질 입자는 전장에서 움직이지 않는다. 단백질의 하전은 그 결합에 관여하는 α-carboxyl기와 α-amino기는 관계가 없으며 amino acid의 carboxyl기와 amino기가 주요 원인이 되는 것이다. Amino acid의 amino기는 용매 중의 물과 반응하여 alkali성을 띠며 carboxyl기는 해리되어 산성을 띠게 된다. 즉, 아래의 반응식으로 나타난다.

참고 자료

식품분석실험, 광문각, 조형용 외, 2003년
전기영동, 의학문화사, 권오헌과 이귀녕, 2002년