<영양학실험>총 콜레스테롤 측정 : 효소법(비색법)

소개글

사진과 그래프를 첨부하였으며,
그 내용을 표로 깔끔하게 정리하였습니다.
또한 여러 참고문헌을 이용하여 중요한 원리와 내용을 담았습니다.
열심히 작성한 문서가 여러분들께 좋은 참고자료가 되었으면 좋겠습니다 ^^

목차

실험제목및 주제
실험날짜
원 리
실험기구 및 시약
실험방법
결 과
고 찰

본문내용

원 리
효소법은 크게 두 가지로 나눌 수 있다. 즉 다음 반응 중의 산소 소모를 측정하는 방법과 생성된 를 이용하여 비색법으로 측정하는 방법이다.

1) 산소 소모법


위의 반응 중에서 소모되는 산소를 oxygen-sensing 전극을 이용하여 측정하여 콜레스테롤을 분석한다.

2) 비색법


생성된 dye를 480~520㎚로 측정된다.

실험기구
및 시약
(1) 효소시약
cholesterol esterase 20.5KU/L
cholesterol oxidase 10.7KU/L
NaOH 1.81g/L
4-aminoantipyrine 1.8mmol/L

(2) Phosphate buffer
Potassium Phosphate, mono basic 13.6g/L, Phenol 1.88g/L

(3) 표준콜레스테롤 농도
Cholesterol 300mg/dl



실험방법



실험방법
1. 시약의 조제법
측정을 시작하기 전에 다음의 시약을 조제한다.

(1) 효소시액
효소시약 1병을 완충액 1병(120ml)으로 용해 한다.
-조제한 효소시약은 냉암소(2~10℃) 보존으로 최소한 1개월간 사용할 수 있다.

Sample
Standard
Blank
혈 청
0.02ml
-
-
표 준 액
-
0.02ml
-
증 류 수
-
-
0.02ml
효소시액
3.0ml
3.0ml
3.0ml
잘 혼합하여, 37℃에서 5분간 Incubation.
60분 이내에 Blank를 대조로 파장 500nm에서 흡광도를 측정한다.
2. 측정조작법
*시약블랭크의 증류수 0.02ml는 넣지 않아도 결과에 영향은 없다.

참고 자료

없음