RNA isolation from monolayer cells by using Trizol reagent

*아*

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최초 등록일: 2007.03.11
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Trizol reagent를 이용해서 RNA를 분리해 낼수 있다

본문내용

What`s the DEPC-DW? Why we use it?
DEPC는 histidyl group을 선택적으로 ethoxyformylation 시킴으로써 RNase의 효소 활성을 inactivation 시키는 역할을 한다. (highly reactive alkiylating agent) 대부분의 RNase의 active site에는 Histidine이 있어서 DEPC는 효과적으로 RNase를 inactivation 시킬 수 있기 때문에 RNA 분리 및 관련 실험에는 RNA 분해효소의 억제제인 DEPC가 처리된 시약을 사용한다. Tris나 다른 amines에 의해 DEPC가 와 Ethanol로 hydrolysis 되는 정도가 증가될 수 있기 때문에 DEPC는 Tris-buffer와는 사용하지 않는다.
② Trizol contains monophasic phenol and guanidinium salts.
What`s the function of these chemicals?
1) Monophasic Phenol : Cell을 깨면서 protein의 3차 구조를 파괴하여 제거하는 역할.

참고 자료

http://kin.naver.com/browse/db_detail.php?d1id=11&dir_id=110205&docid=364967
http://blog.naver.com/
킴볼 생화학(John w. Kimvall. 탐구당 1996.)
Recombinant DNA.
실험 생화학 개정 3판, 한국 생화학회(1997)
2006 생화학실험2 후반부 교본

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