분자 생물학 기초실험

소개글

미생물에서 plasmid DNA 를 분리하고 PCR을 이용하여 DNA를 증폭하고 제한효소를 이용하여 DNA를 절단한 후 Mini Gel Unit를 이용하여 전기영동법에 의해 DNA를 분리하고 확인한다. Plasmid DNA를 이용하여 미생물 형질전환을 한다.

목차

실험목적
실험 원리 및 배경
실험 기구 및 시약
실험방법

본문내용

1. 실험 목적
미생물에서 plasmid DNA 를 분리하고 PCR을 이용하여 DNA를 증폭하고 제한효소를 이용하여 DNA를 절단한 후 Mini Gel Unit를 이용하여 전기영동법에 의해 DNA를 분리하고 확인한다. Plasmid DNA를 이용하여 미생물 형질전환을 한다.

2. 실험 원리 및 배경

1)PCR

PCR(Polymerase Chain Reaction)법은 유전자 진단 방법 중 하나로 중합 효소 연쇄
반응이라 하며 세포의 복제도구를 이용해 DNA의 특정부위를 단시간에 수백만 배로 증폭
합성하는 기술이다. PCR은 극소량의 DNA나RNA를 대량으로 증폭하여 유용한 정보를 얻을
수 있는 상황이라면 중합효소 연쇄반응이 활용될 수 있기에 여러 다양한 학문에 응용되어진다.
1983년 Kary B. Mullis가 미세한 시료에서 DNA분자 내의 뉴클레오티드의 정확한 위치를
알아내는 기술연구를 통해서 얻게 되었고 이때 개발된 PCR 기술은 cloning 방법을 사용하
지 않고 특정의 짧은 DNA 분절을 직접 증폭(amplification) 시키는 것으로 이것으로 그는
노벨 화학상을 받았다. 일상생활에서는 에이즈를 유발하는 HIV 에 최근 감염된 사람의 혈
액표본으로부터 HIV 유전 물질 등을 식별할 때, 과학수사(외화 드라마 ‘C.S.I`에서 자주 나
오는 것) 시료(예: 정액, 모발 또는 건조 혈액), 미라 잔존물, 화석(예컨대, 영화 ‘쥐라기 공
원’에 나온 것) 으로부터 식별할 때 사용되기도 한다.
PCR에 사용하는 DNA 중합효소는 Taq polymerase를 사용한다. 온천에 사는 박테리아인
Thermus aquaticus에서 추출한 것으로 열에 대한 저항성이 강한 DNA중합효소로 열처리
과정에서 변성이 일어나지 않고, 따라서 신장 단계 초기마다 중합효소를 넣는 번거로움 없
어지기 때문이 사용되어 진다. .

참고 자료

없음