[생명공학실험] 미생물 접종 및 배양과 Simple staining and microscopy

목차

1. 실험목적
2. 실험원리
(1) 배양
(2) 순수배양(pure culture)
(3) 배양 방법
1)혼합 평판 배양법, 주입평판 배양법(Pour palte method)
2)도말 평판법(Streak plate method)
3)분산 평판법
(4)염색반응
(5)염색성
(6) 미생물 희석법
(7) 미생물 염색
(8) 염색하는 기본적인 방법
(9) 현미경(microscope)
(10) 광학현미경의 구성
(11) 상의 형성
(12) 배율
(13) 해상력
(14) 미생물의 형태와 구조
3.시약 및 기자재
4. 실험방법
6. 실험참고사항

본문내용

1. 실험목적
1) 순수배양법을 익힌다.
2) 단순염색 방법을 배운다.
3) 광학현미경을 이용할 때 염색의 이점을 평가한다.
4) 다양한 형태학적 모양과 세균세포들의 배열을 관찰한다.

2. 실험원리

(1) 배양
실험실에서 생물체(주로 미생물 및 발생중인 동식물의 배)나 생물체의 일부(기관 ·조직 ·세포 등)를 적당히 인공적으로 조절한 환경조건에서 생육시키는 행위를 말한다.
① 혼합 배양(mixed culture) : 두 종류 이상의 균을 함께 배양하는 것
② 순수 배양(pure culture) : 혼재된 균군 중에서 원하는 균만 따로 분리하여 배양하는 것

(2) 순수배양(pure culture)
순수 배양이라 함은 다른 종류의 생명체가 섞여있지 아니한, 단일종의 미생물 집단이 있는 상태를 말 한다. 자연상태로부터 단일 종류에 미생물을 얻기 위해서는 첫째 다른 것으로부터 순수하게 분리하여 야 하며(isolation), 둘째 순수 분리한 균을 적절한 환경에서 다른 미생물의 오염이 없는 것이 배양 (cultivation)하는 두 단계의 과정을 거쳐야 한다.
**순수분리 및 배양방법
여러 가지 미생물들이 섞여 있는 재료로부터 한 종류의 미생물을 분리하는 방법을 순수분리법이라고 한다. 여기에는 한천 배지의 표면이나 깊숙한 내부에서 독립된 콜로니(colony)를 형성하도록 한 다음 분리하는 방법이다. 목적하는 미생물을 효과적으로 순수준리하기 위해서는 다음과 같은 예비조작을 시행하기도 한다. 즉, 증균배지를 사용하여 순수분리 하고자 하는 미생물의 개체수를 다은 잡균의 수 보다 월등하게 많아지도록 증식시키거나, 병원균의 숙주에 대한 특이성을 이용하여 병원균을 동물에 접종 증식시킴으로써 잡균을 제거하거나 재료를 80℃에서 15분간 열처리하여 내생포자만을 살아남게 하여 이들을 순수분리 하는 것이다.

참고 자료

1. 한국미생물학회, “미생물학 실험” , 아카데미 서적, 1987
2. 홍순우, 최신일반미생물학 실험, 효일문화사, 1997
3. Harry W. Seeley, Jr. Paul J. VanDemark, "Microbes in Action" , 3rd ed., W. H. Freeman and Company.
4. Harold J. Benson, "Microbiological Applications" , 5th ed., Wm. C. Brown, Publishers.