[미생물 관찰] 그람염색에의한 미생물 관찰

목차

1. 실험목적
2. 실험기구 및 시약
3. 실험이론
4. 실험시 주의 및 참고 사항
5. 실험방법
6. 실험결과
7. 결과 및 토의
8. 참고문헌

본문내용

1. 실험목적
세균의 동정, 분류의 중요한 지표인 그람 양성균과 음성균을 구분한다.
분별염색의 원리와 조작법을 습득한다.

2. 실험기구 및 시약
시료 (상수원수, 하수, 포기조 의 각 시료)
Crystal Violet, Gram's iodine, 95% alcohol, Safranin, 증류수
광학현미경, 렌즈 페이퍼, 알콜램프, 피펫, 필러, 슬라이드, 커버글라스, 티슈, 비닐장갑, 앞 치마

3. 실험이론
그람염색법은 1884년 Hans Christian Gram에 의해서 처음으로 개발된 방법으로 각종 검체및 배양집락의 현미경적 검사에 이용되며 미생물에 의한 감염여부를 조기에 진단할 수 있게 해준다. 그람염색은 각 세균의 세포벽을 이루고 있는 성분과 구조에 따라 다르게 나타나는데 그람양성세균의 경우 세포벽이 두꺼운 peptidoglycan layer와 풍부한 teicoic acid로 이루어져 있어서 organic decolorizer(탈색제)로 탈색시 쉽게 탈색되지 않으며, 따라서 염색액 crystal violet이 계속 세균내에 남아있어 보라색으로 염색된다.
반면 그람음성세균은 peptodoglycan layer가 단일층으로 되어 있으며 세포벽이 지방성분이 풍부한 lipopolysaccharide(LPS)로 이루어져 있어 organic decolorizer(탈색제)에의해crystal violet이 쉽게 탈색되며 따라서 대조 염색액인 safranin에 염색되어 붉은색을 나타낸다.

참고 자료

Standard Method 18th Edition
수질 오염 공정시험법 - 환경부(2000)
최신 환경 미생물학 - 송홍규, 오계헌 편저