[기초생화학실험]urinalysis

목차

1. Result
1) Phospholipid
2) Cholesterol
3) Urinalysis
(4) Ketonuria

2. Discussion
1) Phospholipid
2) Cholesterol
3) Urinalysis

본문내용

1) Phospholipid
(1) 실험원리 : ethanol과 ether 혼합액에 plasma를 넣고 vortex한 다음 가열과 거름 과정을 거치면 plasma에 포함된 phospholipid가 분리된다. 이 용액을 가열하여 ethanol, ether 혼합액을 증발시키고 인지질만 남긴다. 여기에 5N H2SO4를 가하고 가열한 뒤 냉각하면 인지질이 가수분해되면서 phosphate가 분리된다. H2O2를 첨가하고 가열하여 황산과 지방질의 화합물을 제거한다. 용액이 무색이 되면 완전히 제거된 것이다. 여기에 ammonium molybdate와 ANS를 넣으면 인산과 molybdate의 결합, 효소 역할을 하는 ANS의 환원 반응 촉진으로 노란색을 띠는 ammonium phosphomolybdate 침전물이 생성된다. 이것을 660nm에서 흡광도를 재면 된다. 이때 standard 용액으로는 인산 한 개를 포함하는 화합물인 KH2PO4 를 이용한다. Standard 용액도 plasma와 같은 과정을 거쳐 실험한 후 흡광도를 재면 된다.
(2) 결과 : 우리 조의 실험은 실패했다. Standard 용액에서 침전물이 생성되지 않았다. 그래서 혈청에 포함된 인지질의 양은 6조의 실험결과를 통해 계산했다. OD of P=(0.053+0.054)/2=0.0535, OD of S=(0.066+0.056)/2=0.061이므로 혈청 인산지방질의 양은 OD of P/OD of S×0.08×1/0.4×100×25=0.0535/0.61×0.08×1/0.4×100×25=438.52mg/㎗이다.

2) Cholesterol
(1) 실험원리 : 콜레스테롤이 포함된 plasma를 ethyl acetate-ehtanol 용액과 섞고 원 심분리하면 plasma에서 콜레스테롤이 추출된다.

참고 자료

https://en.wikipedia.org/wiki/Benzidine
https://www.bioscience.pk/topics/pathology/clinical-pathology/item/828-tests-for-detection-of-blood-in-urine
https://en.wikipedia.org/wiki/Heme
https://en.wikipedia.org/wiki/Hypochlorite
https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC1261013/
Textbook of Medical laboratory Technology; Praful B. Godkar
https://www.bioscience.pk/topics/pathology/clinical-pathology/item/823-test-for-detection-of-bilirubin-in-urine
THE DETERMINATION OF INORGANIC PHOSPHATE IN THE PRESENCE OF LABILE PHOSPHATE ESTERS-Oliver H. Lowry and Jeanne A. Lopez, J. Biol. Chem. 1946