단백질의 정량 분석법- Kjeldahl법(킬달법)

소개글

단백질 정량에 대한 이론과 실험방법에 대한 실험 레포트입니다

목차

1. 목적 및 원리
2. 재료, 시약 및 기구
3. 실험방법
4. 실험결과
5. 고찰
6. 참고문헌

본문내용

1. 목적 및 원리
● 킬달법의 원리
식품 속에 포함되어 있는 단백질은 주로 탄소(C), 수소(H), 산소(O)로 이루어져 있는데 이외에도 반드시 질소(N)를 일정 비율로 함유하고 있다. 질소는 단백질 이외의 다른 주요 식품성분에는 들어있지 않기 때문에 식품 속의 질소량을 구한 후 단백질환산계수를 곱하여 단백질 함량으로 간주한다.
질소 정량법으로는 오래전부터 사용된 Kjeldahl법이 있고 이 방법이 가장 널리 사용되어 왔다. 또한 적은 시료량으로 짧은 시간 내에 분석 가능하도록 개량된 semimicro kjeldahl법 또는 micro kjeldahl법도 있다.
Kjeldahl법은 중화적정을 이용한 정량법으로 분해, 증류, 적정의 세 단계로 구분된다.

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5. 고찰
실험에 사용한 시료인 치즈의 성분분석표를 참고해보면, 치즈 1매 20 g에는 단백질이 4 g이 포함되어 있으므로 실제 단백질 함량은 20%이다. 실험에서 측정한 치즈의 단백질 함량은 14.63%로 이보다 낮게 측정되었다. 오류의 원인을 추려보면 다음과 같다.
① 샘플 오류 - 실험을 할 때 각 조마다 3개의 샘플을 가지고 실험했는데 우리 조는 중화를 하다가 샘플 하나가 폭발하는 바람에 2개의 샘플로만 실험을 진행했다. 따라서 실험결과 계산 값에 오차가 발생했다.
② 중화 오류 – 증류 단계를 위해서 각 샘플을 NaOH로 중화하던 단계에서 갑작스러운 중화반응 때문에 시료가 튀어 그 안에 포함된 질소량만큼 오차가 발생했다.
③ 적정 오류 – 증류 단계에서 포집한 암모니아의 양을 알기 위해 붕산용액을 HCl로 적정할 때
이외에도 적정실험을 통해 정확히 알아낸 역가가 아닌 임의의 역가값을 사용해서 오차가 발생할 수도 있지만 역가에 의한 결과값의 차이는 미미하므로 이는 무시하도록 한다.

● 킬달법 시료 채취법
kjeldahl법을 이용하여 시료를 분석하기 전 적정량의 시료를 채취하는 것도 매우 중요한 단계이다. 시료의 양이 너무 많을 경우 적정 용액이 모자라고 반대로 시료의 양이 너무 적을 경우 사용된......<중 략>

참고 자료

LABCONCO. 1998. A Guide To Kjeldahl Nitrogen Determination Methods and Apparatus
http://www.foragetesting.org/lab_procedure/sectionB/3/part3.1.htm
노봉수 외 4인. Food Analysis 실무를 위한 식품분석학. 수학사(2015).
식품의약품안전처. 식품첨가물공전. Available at: http://www.mfds.go.kr/fa/index.do?serialno=36&page_gubun=1&nMenuCode=12&com_serial=9 (2017.03.27)
채범석∙김을상. 영양학사전. 아카데미서적(1998).