Plasmid DNA isolation, DNA gel electrophoresis

*영*

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Ⅰ. Materials

Ⅱ. Methods

Ⅲ. Result
1. ㉡(내 결과)이 ㉠,㉢ 과 band의 위치가 조금 다른 이유
2. 농도

Ⅳ. Discussion
1. Sol 1, 2, 3의 각각의 조성과 적용원리
2. Ethanol precipitation
3. RNase A
4.TAE buffer 조성 및 역할
5. Agarose gel, 6X gel loading buffer

Ⅴ. Reference

본문내용

Ⅰ. Materials
Alkaline Iysis SolutionⅠ, SolⅡ, SolⅢ, 100% EtOH(-20℃), RNase A, D.W., pipette, tip, 1.5ml tube, centrifuge, broth cultured – transformed E.coli cell, agarose gel, 1/2 TAE buffer, mupid(gel loading tank), 6X loading dye, EtBr, latex gloves, etc.

Ⅱ. Methods
1. 1.5ml tube에 test tube의 배양액을 1ml 따른다.
2. 12000rpm에서 1분간 원심 분리한다.
3. 상층액을 깨끗이 제거한다.
4. SolⅠ 100㎕를 넣은 후 vortexing하여 pellet (바닥의 침전물)을 녹여준다.
5. SolⅡ 200㎕을 넣은 후 inverting 20회 한다. (점액질로 변성이 될 때까지 해준다.)
6. SolⅢ 200㎕을 넣은 후 흔들어 섞어준다. (흰색 건더기가 생기는 것을 확인한다.)

참고 자료

남상욱 외 2인, 유전공학의 이해 제 2판, p40~41, p52
이병무, 유전자 클로닝과 DNA분석, 월드사이언스, p58~59
promega, pGem-Tand pGem-T easy vector systems manual
http://m.blog.naver.com/j1076/220187919339
http://blog.naver.com/PostView.nhn?blogId=gospel89&logNo=80083252084
http://blog.naver.com/PostView.nhn?blogId=sksmstjdcns&logNo=50169276698
http://blog.naver.com/hafs_snu/70178441723

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