[생화학실험] 생화학 실험 보고서

소개글

실험 #1 : Plasmid를 이용한 박테리아의 형질변환 및 selection
실험 #2 : Agarose gel electrophoresis를 이용하여 박테리아 배양액으로 증폭한 Plasmid DNA와, 배양액에서 추출한 플라스미드를 제한효소와 반응시킨 DNA의 비교

이 2개의 실험에 관한 실험레포트입니다.

목차

1. 실험 목적
2. 실험 이론 및 원리
3. 실험 기구 및 시약
4. 실험 방법
5. 실험 결과
6. 토의 사항
7. 참고 자료

본문내용

1. 실험 이론 및 원리
1.1. pBluescript SK & GDA의 구성 및 특징
Plasmid DNA의 일종인 pBluescript Ⅱ SK(+)는 [그림 1]과 같이 구성이 되어있으며 형질 전환시 암피실린의 내성이 생기는 DNA가 selection marker로 쓰인다. 이번 실험에서는 pBluescript plasmid와 여기에 GDA단백질을 첨가한 pBlue-GDA plasmid를 사용하는데 GDA DNA가 들어가는 위치는 pBluescript plasmid의 lac Z 의 사이, 더 정확히 말하면 T3, T7 primer binding site의 사이에 들어가게 된다.(사용된 제한효소는 EcoRⅠ이다) 따라서 두 플라스미드의 차이는 lac Z 유전자의 정상 발현 여부이며 이는 실험에서도 두 플라스미드에 의해 형질전환 된 박테리아를 배양함으로써 그 차이를 눈으로 확인해 볼 수 있다.

<중 략>

형광이란 물질이 빛의 자극에 의해서 발광하는 현상을 말하며 빛에너지를 받은 물질이 새로운 빛을 내는 것으로 반사와는 다르다. 형광 단백질은 특정 파장의 빛을 받을 경우 이를 흡수하여 활성화 된뒤 다시 정상상태로 되돌아 가는 과정에서 특정 파장의 빛을 외부로 발산함으로써 독특한 색깔의 빛을 내는 단백질을 일컫는다. 이러한 형광 단백질은 특히 생명공학 연구에서 중요한데 형광 단백질을 특성을 알고자 하는 단백질 앞쪽 혹은 뒤쪽에 결합시킴으로써 실험에 사용되는 단백질의 발현 과정이나 세포내 위치등을 쉽게 알 수 가 있다. 또한 의학적인 관점에서는 암세포나 종양세포의 위치를 파악하는데도 사용될 수 있다.
현재 실험실에서 널리 사용되는 대표적인 형광 단백질로는 녹색 형광을 나타내는 GFP(Green Fluorescence Proein)를 비롯해 적색의 RFP, 청록색의 CFP, 청색의 BFP, 황색의 YFP등 많은 종류의 형광 단백질들이 개발되어서 상업적인 용도, 혹은 개별 실험에서 많이 사용되고 있다.

참고 자료

없음