프로테아제 활성도 측정

목차

1. 실험의 배경지식
2. 원리 및 목적
3. 실험시약 및 실험기구
4. 실험방법
5. 데이터 및 계산
6. 실험결과 및 고찰
참고문헌

본문내용

프로테아제는 비 특이성 단백질과 펩티드결합을 가수분해하여 아미노산 또는 펩티드 혼합물을 만드는 효소로 단백질 분해 효소라고도 불린다. 단백질 중 특정 아미노산 잔기의 아미노기 쪽 또는 카르복시기 쪽의 펩티드결합을 쉽게 자른다. 대부분 분자량이 2만~4만인 단순단백질이나 당이나 금속이온이 있는 복합단백질로 이루어져 있다.
단백질의 주성분인 아미노산을 다른 단백질 분해를 통해 섭취할 때 필요하며, 단백질의 아미노산 배열 결정에도 중요한 역할을 한다. 또한 인체 내외에서 불필요한 단백질을 제거하거나 효소와 같은 생물활성을 가진 단백질과 펩티드의 전구체에서 불필요한 부분을 분리시켜 활성화할 때 등 중요한 역할을 하고 있다.

<중 략>

․ 실험 시약 : Flavourzyme (Novo Nordisk, flavourzyme 500MG),
0.6% casein 용액, 0.1M 인산염완충용액(pH 6.8), 0.1N-NaOH 용액
0.1N-H3PO4용액, 0.44M trichloroacetic acid용액, 0.55M-Na2CO3,
Folin(1N) 시약
․ 실험 기구 : micro pipet, pipet tip, vortex ,water bath, 시험관, 깔대기, 여과지, 증류수,
분광광도계

<중 략>

미리 조제된 효소액을 사용하여 casein용액 5ml를 가하고 10분간 50℃항온수조에서 반응시켰다. 단백질 반응을 중지시키기 위해 침전제 역할을 하는 TCA를 넣어 흔들고 다시 30℃항온수조에 30분간 방치하였다. 하얀 침전물이 생겨 여과지로 걸러내고 여액 2ml에 Na2CO3 용액 5ml를 넣고 흡광도 측정위해 색을 보기위한 Folin시약 1ml를 넣어 항온수조에 30분간 방치한 후 흡광도를 측정하였다.

참고 자료

식품분석 화학, 우자원, 광문각
화학용어사전편찬회, 화학용어사전, 일진사