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배양액 희석 후 Spreading 배양

*찬*
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최초 등록일
2014.10.19
최종 저작일
2014.04
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목차

1. 실험 번호: 실험 주제
2. 실험 목적
3. 실험의 이론적 배경 및 주의사항
4. 시약 및 재료
5. 실험 방법
6. 결과 및 고찰
7. 참고문헌

본문내용

- 실험2. 배양액 희석 후 spreading 배양

2. 실험 목적
- 배양액을 1/10, 1/100, 1/1000, 1/10000으로 희석하여 LB-Amp plate에 Spreading 배양한 후 colony 수 확인.

3. 실험의 이론적 배경 및 주의사항
- 배경 :
① Spreading 접종
spreading은 멸균된 유리봉을 이용하여 배지 전체에 시료를 도말하는 것이다.
이를 행하는 목적은 미생물을 계수를 하기 위함인데, 넓게 펼쳐 배양함으로써 싱글콜로니를 얻을 수 있다.
Spreading을 할 때 희석을 하는 이유는 원액배양액에 균이 너무 많이 존재하기 때문입니다. 원액을 그냥 spreading을 한다면 평판배지에 콜로니들 이 뭉쳐서 나타나기 때문에 제대로 된 콜로니 카운트를 할 수가 없습니다. 대부분 spreading방법은 희석평판배양법에 사용되는 도말방법입니다.

② 배양액 희석법
1/10 희석 -> MRS 배지 1 : D.W. 9 를 넣으면 1/10 희석액입니다. (물이 9가 들어가면 물 9에 배지 1이 되므로 배지는 총 10 이라는 숫자 중 1만 차지하므로 1/10 희석액입니다)
1/100 희석 -> 1/10 MRS 배지액 + D.W. 9 를 넣으면 1/100 희석액입니다.
이후로도 마찬가지입니다. 이런 방법을 serial dilution이라고 합니다.

③ 형질전환
외부에서 주어진 DNA에 의해 생명체의 개체나 세포의 형질이 유전적으로 변 하는 현상.
형질 전환 실험이란 열처리하여 죽인 병원성균(S형)과 살아 있는 비병원성균 (R형)을 섞어 주사하면 형질 전환이 일어나 쥐가 폐렴에 걸려 죽는다.
이 경우 죽은 쥐에서는 살아 있는 병원성균이 추출되며, 다른 쥐에 이것을 주 사하면 그 쥐도 폐렴에 걸려 죽는다.

참고 자료

http://kin.naver.com/qna/detail.nhn d1id=11dirId=1116docId=164348894qb=67Cw7KeAIO2drOyEnQ==enc=utf8section=kinrank=1searchsort=0spq=0pid=R3MXFc5Y7uGssbwecphsssssssV458326sid=U3OsqHJvLBYAAA7wDH4
http://www.cyworld.com/yangminn/3452209
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