생명과학 실험 단백질 분리 정제 및 기능 분석 파트 전반 A+ 보고서 Colum Chromatography

목차

Ⅰ. Introduction
Ⅱ. Methods
Ⅲ. Result
Ⅳ. Discussion
Ⅴ. Reference

본문내용

Ⅰ. Introduction

(1) 실험 날짜 : 2012년 03월 14일 수요일 (6-7교시)

(2) 실험 주제 : 단백질 분리 및 기능분석(1)
⇒ Column Chromatography 의 준비로서의 Buffer 만들기
(3) 실험 목표 : 1M Tris-HCl(pH7.4), NaCl, MgSO₄, Stock Solution 을 제조한 후 다양한 NaCl 농도의 Elution Buffer 를 만든다.

(4) 실험 원리

1. Buffer
① 완충용액 이란?
: 보통 산과 짝염기와의 혼합물로 이루어지며, 소량의 산(H+) 또는 염기(OH¯)가 외부로부터 어느 정도 첨가되었을 때 그것들의 영향을 받지 않고, 수소이온 농도(pH)를 일정하게 유지하려고 하는 용액. 일반적으로 약한 산과 그 염(짝염기), 또는 약한 염기와 그 산(짝산)의 혼합용액이 완충작용을 한다.

<중 략>

3. 보통 단추는 Calibraton의 약자로 CAL이라고 적혀있는데, 이 단추를 누르고 난 뒤 전극의 검출부를 pH 4.01 표준용액으로 1회 이상 씻은 다음 전극을 pH 4 표준용액이 들어있는 삼각플라스크에 담근다.
4. 담근 후 pH가 4.01가 되었을 때 OK 버튼을 누르면 4.01 OK라는 표시와 함께 4.01 Calibration이 끝난 것이다.
5. 다음 실험을 위해 증류수로 전극을 깨끗이 세척한 후에 마른 휴지로 잘 닦는다.
6. 앞의 방법과 동일하게 pH7.0도 Calibration한다.
7. 그러면, 이제 이 pH meter는 이 두 개의 값을 기준으로 잡고 다른 용액의 pH를 잴 수 있다.

③ 유의 사항
1. 유리전극은 사용 전후에 반드시 씻는다. 밑에 비이커를 받치고 위에서 아래로 향한 물줄기를 사용하여 전극을 씻어 내린 다음 매어달린 물방울은 부드러운 종이를 살짝 대어 빨아낸다. 이때, 유리를 치거나 긁지 않도록 조심하여야 한다. 사용이 끝나면 물 또는 적당한 완충용액에 담구어 둔다.

참고 자료

http://blog.naver.com/amen15?Redirect=Log&logNo=66548702
http://blog.naver.com/istek?Redirect=Log&logNo=110045713479
http://100.naver.com/100.nhn?docid=812755
http://blog.naver.com/lyj9871?Redirect=Log&logNo=40002279207
http://blog.naver.com/roddown?Redirect=Log&logNo=140008215744