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[면역학] PCR 실험및 활용방안

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최초 등록일
2003.05.15
최종 저작일
2003.05
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소개글

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목차

I. 서론

II. 본론
1. PCR(Polymerase chain reaction)
2. component of PCR
(1) Primer set   
(2) dNTP
(3) Taq polymerase
(4) Mg2+
(5) Salt (KCl) concentration
(6) Reaction additives
(7) Reaction overlay
3. PCR의 특이성
(1) Pre-PCR status
(2) denaturation
(3) annealing
(4) extention
(5) PCR cycle
4. PCR시 고려사항
(1) Pipetting & DNA template
(2) Setting up the Laboratory
(3) PCR cycling program
(4) Equipment (Therm℃yclers & PCR tubes)
5. PCR 실험
(1) Materials
(2) Procedure & Observation
(3) Result analysis
(4) Discussion
6. 다양한 PCR 기술
(1) PCR-direct sequencing
(2) RT-PCR(RNA 특정 부위 증폭)
(3) DDRT-PCR(differential display reverse transcription-PCR)
(4) QC-PCR(RNA 정량)
(5) Inverse PCR
(6) PCR-SSCP (single strand conformation polymorphism)
(7) IS-PCR (in situ PCR)
(8) RACE (rapid amplification of cDNA ends)
(9) Site-directed mutagenesis
8. PCR의 응용분야
(1) 작물 개량에 있어서 PCR기법의 응용
(2) PCR을 이용한 유전자 복제
(3) PCR를 이용한 돌연변이 탐지
(4) PCR의 법의학 응용
(5) PCR을 이용한 성 감별
(6) 사람 유전자의 mapping
(7) 식품 및 환경속의 미생물 검출을 위한 PCR의 응용
(8) GMO 확인
(9) Evolutionary biology(진화의 생물학)

III. 결론

IV. 참고문헌

본문내용

Polymerase chain reaction(PCR) technique은 1980년대 중반 K. Mullis에 의해서 고안된 기술이다. 이 PCR techinique은 유전자를 연구, 분석하는 분자유전학에 혁신을 일으켰다. PCR(Polymerase Chain Reaction)법은 DNA 가닥의 열변성(denaturation step), primer와의 annealing(annealing step), polymerase에 의한 DNA 합성 신장 반응(Extension step)를 반복하여 실시함으로써 in vitro에서 DNA를 증폭하는 방법이다. 이 방법을 사용하면 DNA를 수 시간 내에 적어도 105배로 증폭할 수 있다. TaKaRa Taq(TaKaRa Code No. R001)는 Thermus aquaticus YT-1주로부터 DNA polymerase 유전자를 클로닝하여 그 유전자를 도입한 재조합체 대장균을 이용하여 대량 발현하고, 고도로 정제한 94 kDa의 내열성 DNA polymerase로 천연의 Taq DNA polymerase와 같은 기능을 갖고 있다.

참고 자료

1) 정동효 , 유전공학 1, 선진문화사 펴냄 (1996)
2) 와티니베 츠토무, 3일만에 읽는 유전자, 서울문화사(2001)
3) 심웅섭, 유전공학의 원리, 고려대학교 출판부 (1998)
4) 이준호외2인, 임상분자생물학 펴냄홍
5) 김신, 홍현표, 김상윤, 권헌일, 유방염으로부터 분리한 황색포도구균의 분자생물학 적 typing과 multiplex PCR을 이용한 장독소의 검출에 관한 연구, 가축위생시험
사업연보 2001/경상북도가축위생사업소 pp.151-158, 2002
6) 서명득, 신기욱, 중합요소연쇄반응(Polymerase chain reaction)을 이용한 돼지 톡소 플라자마병의 조기 진단에 관한 연구,대산논총 pp.283-293, 2002
7) 김홍란 조성관 이규철 이현아 강혜나 홍성화 이찬희 ,유전자 증폭기술에 의한 혈액 내 인체파보바이러스 B19의 검출,Journal of bacteriology and virology Vol.32(3) pp.285-290, 2002
8) http://yckim.chungbuk.ac.kr/bi℃hem/2001/20303.html
9) http://inhavision.inha.ac.kr/~leecg/bbs/biology/biology13.htm
10) http://sh76.hihome.com/ImportedFiles/biology-pcrU.htm
11) http://myhome.netsgo.com/kksiyi/NetsgoWizard/page20.htm

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