PLD를 이용한 PC의 가수분해 예비

목차

1. 실험 목적
2. 실험 원리
3. 실험 방법

본문내용

1. 실험 목적
Lysozyme의 역할과 분리법을 이해하고 계란 흰자로부터 Lysozyme을 분리해 낸다.
2. 실험 원리
(1) Lysozyme
Lysozyme은 미생물들의 무코 다당류와 무코 폴리펩타이드의 N-acetylmuramic acid와 2-aceteamido-2-deoxy-D-glucose 사이의 β-1,4 결합을 가수분해하는 효소로서 계란흰자위, 눈물 및 식물조직에 많이 존재하며, 외부에서 침입하는 박테리아의 세포벽에 있는 무코 다당류를 가수분해하여 파괴시키는 작용을 한다.
Lysozyme은 단일 polypeptide 사슬로 된 단백질이며 네 개의 이황화결합으로 교차 결합되어 있다. 그리고 이 단백질은 등전점이 높으며 (pI=11.0) 분자량이 14,600 정도 밖에 되지 않는 작은 단백질이다. 이러한 특성들을 이용하여 이온교환 chromotography 또는 배제 chromotography에 의해 이 효소를 정제할 수 있다.

<중 략>

(5) 정제 과정에 있어서의 효소 분석법
효소 정제는 그 밖의 단백질을 선별하여서 제거하는 것이므로 존재하는 단백질의 양에 관한 효소 활동도의 양을 정하여야 한다. 1mg 단백질의 효소 활동도를 정제 과정에서 얻는 여러 분획들에 있어서의 효소 순도를 표시하는데 사용할 수 있다. 다음과 같이 고유 활동도 (specific activity)는 효소의 활동도와 단백질의 양 측정으로부터 구할 수 있다.

고유 활동도 (specific activity) = (단위수) / (mg 단백질)

그 밖의 중요한 값들은 총 활동도와 수득률이다. 효소 제조물에 대한 이러한 값들을 알기만 하면 여러 가지 기법들을 적용하여 효소의 정제를 진행시킬 수 있다.

참고 자료

없음