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PCR 예비보고서 결과보고서 프로토콜

*웅
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최초 등록일
2013.04.08
최종 저작일
2012.09
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소개글

생명과학 전공실험중 PCR,전기영동 부분입니다.

10/10점 받았습니다.

예비보고서, 결과보고서, 프로토콜이 모두 들어있으며

예비보고서는 이론위주로 결과보고서는 고찰위주로 되어있습니다.

목차

1) PCR의 원리
2) PCR에 필요한 material
3) 전기영동(gel electrophosis)
4) 보너스 문제
5) 참고문헌

실험 결과 보고서

1. 실험목적
2. 실험 재료 및 방법
3. 결과
4. 고찰
5. 참고문헌

본문내용

1. 실험날짜 : 12.09.14
2. 실험제목 : PCR (Polymerase chain reaction)
3. 학번, 이름 :
4. 실험이론

1) PCR의 원리
중합효소연쇄반응(Polymerase chain Reaction)의 약자로서 DNA Polymerase를 이용하여 DNA의 양을 증폭시키는 기술이다.

PCR의 장점
a. 많은 수의 다른 DNA혼합물로부터 원하는 유전체의 단일 절편을 쉽게 얻을 수 있다.
b. PCR은 아주 적은 양의 DNA만으로도 가능하다.

PCR의 단점
a. Primer를 합성하기 위해서는 증폭하고자 하는 부위의 염기 서열을 알아야 하고, 5kb이상의 긴 DNA는 증폭이 어렵다.

<중 략>

2) 실험의 의의
① 목적 : 이번 실험은 marker PCR을 통해 이후 transformation 실험에 사용할 Marker와 gene homologous sequence가 달린 product를 만드는것이다.
② Product의 설명 : Marker는 동일한 pRS313의 Histidine발현부분이고 각 sgs1, msh6의 gene homologous sequence 가 양 끝에 달린 product가 생성된다. 이것은 이후 transformation으로 해당 gene을 knock-out(deletion)하는데 사용된다.
③ 이후의 실험간의 사용 : 이후 우리는 LiAc tranformation을 통해 해당 Marker를 transformation 하게 되고 이를 SD(His-) 배지에 키워 pRS313이 His를 발현 가능하므로 transformation 된 yeast만 알수 있게 된다. 이후 PCR을 통해 다시한번 제대로 transformation이 되었는지 확인을 한다.

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