cell culture

소개글

cell culture

목차

① Cell culture
② 세포배양의 필요조건

1. 실험방법
2. 참고문헌

본문내용

① Cell culture
생물체의 조직으로부터 분리된 세포를 배양하는 것으로 식물에서는 캘러스 일부를 액체배양하거나 동식물의 종양 세포를 배양하는 일이 흔하다. 세포배양으로 얻은 세포군이 경우에 따라서는 1개의 개체로 생장하기도 한다.
Cell culture를 하기위해서는 배지가 있어야하는데, 흔히 powder 형태의 것을 구입해 물에 녹인 후 filtering하여 제균하고 serum과 항생제 등을 첨가하여 사용한다. Animal cell culture에 사용하는 배지는 많은 종류가 있다. Alpha MEM배지는 MEM의 성분에 아미노산, 비타민 등이 추가로 첨가되어있어 동물세포의 DNA형질전환에 유용하다. BME배지는 세포성장에 필요한 필수 영양분 및 무기염류와 비타민류에 대한 연구의 결과로 얻어진 배지로 MEM과 DMEM의 기본조성이 된 배지다. DMEM배지는 BME의 변형된 형태로 BME에 비해서 아미노산이 4배정도 많다. MEM배지는 BME에 비해서 아미노산의 농도가 더 높고 CO2 NaHCO3의 완충작용을 위해 Earle`s salts를 포함하고 있다. 많이 쓰이는 배지는 DME 배지(Dulbecco`s Modified Eagle`s Media)이다.

② 세포배양의 필요조건
⑴ 무균상태 : 배양액 중에는 다량의 영양물질이 포함되어 있으므로 미생물이 혼입되면 빠른 속도로 증식해 배양액 중에 영양물질의 소비대사에 의한 pH저하되고 배양세포에 유해한 물질 생산에 의해 목적했던 세포는 사멸되기 때문에 모두 무균상태여야 한다.
⑵ 온도 : 모든 세포에는 적정온도에서 존재, 적정온도보다 높으면 사멸한다.
⑶ pH : 대부분의 세포는 pH7.2~7.4에서 가장 잘 증식
⑷ 삼투압 : 배양액의 삼투압은 식염 및 포도당으로 조절
⑸ 영양원 : 탄수화물, 아미노산, 비타민, 펩타이드 및 단백질은 필수 영양소이며 그밖에도 무기이온, 산소, 탄산가스도 필요한 성분이다.

참고 자료

분자 세포 생물학, 자유아카데미, P.14~15
분자 생물학 실험서, 월드사이언스, 김영혜, p.205~221
필수세포생물학, Alberts외 2인, 교보문고, p.344~345
Molecular Biology, Robert F, p.85
분자 세포 생물학, Roblsh 외 7인, 월드사이언스, P.555, 381, 387, 589, 939
분자 생물학, 한국분자생물학회, 아카데미 서적, P. 896