겔크로마토그래피

소개글

유기화학물의 분석법중에서 겔크로마토그래피에 대한 설명입니다.
자료내용을 좋습니다. 총9장입니다.

목차

겔 크로마토그래피?
겔크로마토그래피의 원리?
겔크로마토그래피의 총부피?
세파덱스와 여러가지 겔크로마토그래피
실험기기 및 시약

본문내용

겔 크로마토그래피는 겔 여과(gelfiltration)또는겔침투(gelpermeation)
크로마토그래피라고한다. 겔 여과 크로마토그래피(이동상은 물)라는
명칭은생화학자들에의해사용되며,겔침투크로마토그래피(이동상은
유기용매)라는 명칭은고분자화학자가사용한다.
겔크로마토그래피는정지상에분자체(molecular sieve)를 사용하는데
이들은세파덱스(Sephadex),폴리아크릴아마이드(polyacrylamide)또
는아가로오스(agarose) 겔로서 친수성이므로 물을 흡수할 수 있고
팽윤된다. 시료 분자의 크기가 팽윤된 겔의 최대 구멍(pore)보다 클
때는, 그 분자는 겔 입자를 통과하지 못하므로 정지상 입자의 공간을
통해서 컬럼 밖으로 나온다.
보다 작은 분자는 겔 입자의 열린 구멍 속에 들어가나 그크기와모양에
따라서 통과하는 속도가 다르다. 그러므로 분자의 크기가 감소하는
순서로 용출된다.

세파덱스 = 겔여과용 담체의 일종

흔히 GPC(Gel Permeation Chromatography)라는 기계에 쓰이는 방법이다.고분자 물질의 분자량을 계산하는데 쓰이는 기계이고 액체 크로마토그래피를 응용한 방법이다.원리는 관(column)안에 다공성의 작은 실리카 또는 고분자 입자로 되어있는데이 구멍으로 용매와 고분자 분자 모두 들어갈 수 있다.고분자의 경우 분자량이 일정하지 않고 넓은 분포를 보인다.분자량이 작을수록 hydrodynamic volume이 작고 분자량이 커질수록 hydrodynamic volume이 커진다.hydrodynamic volume에 의해 크기가 결정 되기 때문에 만약 구멍 크기보다 크다면 들어 갈 수 없다.그렇게 되면 관안에 들어간 용액 중에서 분자량이 큰 분자는 구멍에 의한 머무름이 없어지기 때문에 빨리 나오고 분자량이 작은 분자는 이 구멍 저구멍 다니느라 늦게 나온다 이걸 자외선이나 굴절률 측정으로 분자량을 알아 낼 수 있습니다.중요한건 이 분자량이 상대적 분자량이라는 건데 상대적 분자량 개념은 다른 표준 물질과 비교해서 나온다는 뜻이다.즉 이미 분자량을 알고 있는 물질을 시간에 따른 검출기 신호로부터 표준을 정한다음 우리가 알고자 하는 물질의 시간에 따른 검출기 신호와 비교해서 분자량을 결정하게 된다.

참고 자료

없음