[생화학 실험보고서] 효소반응속도론

소개글

alkaline phosphatase라는 효소를 이용하여 효소반응속도론을 학습하는 것 을 목적으로 하는 실험입니다.

목차

1. 목적

2. 원리

3. 시약 및 기자재

4. 실험방법

5. 결과

9고찰

본문내용

1. 목적
효소반응속도론(enzyme kinetics)이란 효소학(enzymology)의 한 분야로서 효소반응의 속도를 결정하는 효소의 농도, 기질의 농도, 속도상수 등 효소반응의 특성을 학습하는 생화학의 핵심 분야 중 하나이다. 실제 항암제, 항바 이러스제 등 치료용 약물의 대다수는 효소의 저해제이다. 즉, enzyme kinetics는 기초 생화학 뿐 아니라 신약개 발에도 필수적인 분야이다. 이 실험은 alkaline phosphatase라는 효소를 이용하여 효소반응속도론을 학습하는 것 을 목적으로 한다.

2. 원리
1) 효소반응의 속도는 효소(enzyme)의 농도, 기질(substrate)의 농도, 저해제(inhibitor)의 농도에 영향을 받는다. 반응속도는 반응시간에 따른 기질과 산물(product)의 농도변화로 표현된다.
반응식이 A + B → C + D 일 때, 반응속도 rate = k[A][B] 로 표현된다.
2) Michaelis & Menten 식 유도
E + S ⇆ ES → E + P
* ES 생성의 정반응 rate constant : k1, 역반응 rate constant : k-1
E + P 생성의 정반응 rate constant : K2, 역반응은 P의 농도가 매우 작으므로 고 려 X steady-state assumption(효소반응이 시작되는 즉시 [ES]는 일정하다는 가 정) 에 의해 d[ES]/dt = 0
d[ES]/dt = k1[E][S] - k-1[ES] - k2[ES]
= k1[S]([E]T - [ES]) - k-1[ES] - k2[ES] = 0
d[ES]/dt = k1[S][E]T - [ES](k1[S] + k-1 + k2)
[ES] = k1[S][E]T / (k1[S] + k-1 + k2)

참고 자료

Boyer, R. F. Modern Experimental Biochemistry. 2nd. 1993. The Benjamin / Cummings Publishing Company.
Farrell, S.O. and L. E. Taylor. Experiments in Biochemistry : A Hands-on Approach. 2nd ed., 2006. Thomson Brooks / cole
생화학실험(1) 실험교본. 교육부의생명특성화사업단
Berg, J. M. et al. Biochemistry 6th ed. 2007. Freeman and Company.
www.wikipedia.org의 figure 참조