화학실험 - 색소의 크로마토그래피 분리와 흡광분석(서울대)

소개글

1) Abstract
이 실험에서는 종이 크로마토그래피에 의한 아미노산 분리를 통하여 극성이 분리에 어떻게 이용될 수 있는지를 배운다.


2) Introduction

종이크로마토그래피를 이용한 아미노산의 분리
크로마토그래피는 원래 식물 색소와 같이 색깔을 가진 것들을 분리하는데 사용되었지만, 물리적인 검출방법이나 발색단과의 반응을 통해 색깔이 없는 혼합물도 분리가 가능하다. 이 실험에서는 색깔 없는 아미노산에 닌히드린(ninhydrin) 용액을 뿌려 색깔을 띠도록 한다.
유사한 구성성분의 아주 적은 양도 크로마토그래피를 이용하여 분리할 수 있다. 분리는 정지상에 이동상을 흘려주면서 이루어진다. 이 실험에서는 특수 처리된 종이(종이크로마토그래피용 종이)에 흡착되어 있는 물이 정지상으로 쓰이고, 알코올과 물의 혼합 용액이 이동상이 된다. 분리되어질 아미노산들은 정지상과 이동상에 서로 다르게 분배되기 때문에 이동상이 종이를 따라 전개될 때 서로 다른 속도로 움직이게 된다. 이러한 분리 방법을 종이 크로마토그래피라고 한다.

분리할 아미노산들의 혼합물의 아주 소량을 크로마토그래피 종이의 한 쪽 끝에 찍는다. 이 지점을 연필로 표시하고 원점으로 한다. 밑 부분에 점을 찍은 종이를 분리에 사용되는 용매와 함께 닫힌 용기에 넣는다.
사용되는 용매는 알코올과 물이 4:1의 비율로 섞여있다. 용매는 모세관 작용에 의해 위로 이동한다. 종이 무게의 30% 정도를 차지하는 물은 정지상으로, 알코올과 물의 혼합 용액은 이동상으로 작용한다. 용매 내의 아미노산들의 분리, 이동 속도는 아미노산의 물에 대한 친화도와 알코올/물 혼합 용액에 대한 친화도의 상대적인 값에 의존한다. 물에 잘 녹는 극성이 아주 큰 아미노산은 정지상에 더 많이 분배되고, 아주 천천히 이동한다. 극성이 덜한 아미노산은 이동상을 따라 더 위로 이동하게 된다.

목차

1) Abstract
2) Introduction
3) Data & Results
4) Discussion
5) Reference

본문내용

1) Abstract
이 실험에서는 종이 크로마토그래피에 의한 아미노산 분리를 통하여 극성이 분리에 어떻게 이용될 수 있는지를 배운다.


2) Introduction

종이크로마토그래피를 이용한 아미노산의 분리
크로마토그래피는 원래 식물 색소와 같이 색깔을 가진 것들을 분리하는데 사용되었지만, 물리적인 검출방법이나 발색단과의 반응을 통해 색깔이 없는 혼합물도 분리가 가능하다. 이 실험에서는 색깔 없는 아미노산에 닌히드린(ninhydrin) 용액을 뿌려 색깔을 띠도록 한다.
유사한 구성성분의 아주 적은 양도 크로마토그래피를 이용하여 분리할 수 있다. 분리는 정지상에 이동상을 흘려주면서 이루어진다. 이 실험에서는 특수 처리된 종이(종이크로마토그래피용 종이)에 흡착되어 있는 물이 정지상으로 쓰이고, 알코올과 물의 혼합 용액이 이동상이 된다. 분리되어질 아미노산들은 정지상과 이동상에 서로 다르게 분배되기 때문에 이동상이 종이를 따라 전개될 때 서로 다른 속도로 움직이게 된다. 이러한 분리 방법을 종이 크로마토그래피라고 한다.

분리할 아미노산들의 혼합물의 아주 소량을 크로마토그래피 종이의 한 쪽 끝에 찍는다. 이 지점을 연필로 표시하고 원점으로 한다. 밑 부분에 점을 찍은 종이를 분리에 사용되는 용매와 함께 닫힌 용기에 넣는다.
사용되는 용매는 알코올과 물이 4:1의 비율로 섞여있다. 용매는 모세관 작용에 의해 위로 이동한다. 종이 무게의 30% 정도를 차지하는 물은 정지상으로, 알코올과 물의 혼합 용액은 이동상으로 작용한다. 용매 내의 아미노산들의 분리, 이동 속도는 아미노산의 물에 대한 친화도와 알코올/물 혼합 용액에 대한 친화도의 상대적인 값에 의존한다. 물에 잘 녹는 극성이 아주 큰 아미노산은 정지상에 더 많이 분배되고, 아주 천천히 이동한다. 극성이 덜한 아미노산은 이동상을 따라 더 위로 이동하게 된다.

참고 자료

표준일반화학실험 제5개정판 (대한화학회) 실험 8 "크로마토그래피" 실험 B
Principles of Modern Chemistry 4th Oxtoby & Nachtrieb