약리학 실험보고서 <Cholinesterase activity 측정 및 Neostigmine에 대한 반응 추정>

소개글

 실험군과 대조군의 비교를 통해 cholinesterase의 활성능과 특정이물(neostigmine)에 대한 억제능을 알아보는 실험입니다.

목차

 실험날짜
 실험목적
 실험이론 및 원칙
♣Cholinesterase
♣Neostigmine
 실험방법
 실험결과
 고찰 및 결론

본문내용

♣Cholinesterase
콜린에스테르를 가수분해하는 효소로 다음의 반응을 촉매한다.
Acetylcholinesterase는 R가 메틸기인 아세틸콜린에 특이하게 작용하는 것으로, 뇌·신경조직·적혈구에 널리 존재하는 중요한 효소이다. 아세틸콜린에스테라아제는 주로 뉴런의 세포체에서 합성되어, 축색을 지나 신경 종말부에 축적된다. 여기서 전달 물질로 작용한 아세틸콜린은 이 Acetylcholinesterase에 의해 급속히 분해된다.

♣Neostigmine
Acetylcholinesterase 및 Cholinesterase를 가역적으로 억제하여 콜린작동성효과를 나타내는 물질이다. 천연의 피조스티그민의 화학구조를 바탕으로 하여 합성한 약품이다. 제4급아민으로 하여 양전하를 띠게 함으로써 혈액뇌관문(Blood brain barrier)을 통과하기 어렵게 하여 말초작용만을 생기게 하도록 고안되었다. Cholinesterase 저해작용 외에 골격근종판에 직접 흥분적으로 작용하는 것이 피조스티그민과 다른 점이다. 콜린작동약으로 작용하기 때문에 마비성 장폐색, 위무력증, 중증근무력증 치료에 사용한다.

♣여러가지 반응

Cholinesterase
①Butyrylthiocholine + Butyric acid + thiocholine

②thiocholine + DTNB → 5Thio-nitrobenzoic acid (Yellow)
5Thio-nitrobenzoic acid : 노란색의 정도로 cholinesterase의 활성여부 측정가능
◆ 실험방법
① Human blood를 약 3ml 취하여 응고방지를 위해 heparine으로 처리된 tube에 넣는다.
②3000rpm으로 20분간 원심분리하여 혈구성을 가라앉히고 serum만 e-tube로 옮긴다(1ml 정도)
③e-tube에 sample을 준비한다(2개)
Sample A(normal group) : serum 400μl

참고 자료

없음