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단백질 정량

*차*
최초 등록일
2002.10.22
최종 저작일
2002.10
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목차

☞ 요약
☞ 서론
1. 단백질 정량하는 방법
2. 단백질 분해 경로
3. proteasome
☞ 실험 재료 및 방법
☞ 결과
☞ 고찰
☞ 참고 문헌

본문내용

☞ 실험 재료 및 방법
1. Proteasome-enriched 분획.
- 냉동 보관된 세포를 TEDA buffer에서 초음파 분쇄기를 이용하여 분쇄하였다. 이 세 포 현탁액을 15000 × g에서 30분간 원심 분리하여 세포막 분획이 제거된 상층액을 세포질 분획이라 한다. 세포질 분획을 100000 × g에서 6시간 동안 초원심 분리하여, 얻어진 침전물을 TEDGA buffer glycerol을 포함하는 TEDA buffer에 현탁시켜 이를 proteasome-enriched 분획이라 한다.
* 이번 실험에서 주의 해야할 것은 몇가지 경우를 제외하고는 모든 과정이 -4도, 즉 ice-crystal water에서 진행되어야 한다.
2. 단백질 정량(lowry method 방법 이용)
- 단백질 정량은 bovine serum albumin(BSA)을 표준 단백질로 사용하여 실시하였다. 500nm의 파장에서 각 시료의 흡광도를 측정하여 BSA 표준 단백질로부터의 표준 곡 선을 이용하여 정량 하였다. 실험 방법은 다음과 같다.

참고 자료

없음

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