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[세포생물]Extraction of genomic DNA(단백질 추출)

*지*
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최초 등록일
2002.10.22
최종 저작일
2002.10
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소개글

..

목차

1.Introduction
2.Meterial & Apparatus
3.Methods
4.Result
5.Discussion

본문내용

이번 실험은 단백질 추출이다. 연구에서 DNA를 필요로 하는 유기체에 이용되는 방법이다. 배추 잎의 세포는 세포질막 속에 들어 있으며, 단단한 세포벽에 의해 둘러싸여 있다. 이러한 모든 벽들은 세포 내용물을 유지시키기 위해 파괴되어야 한다. 세포를 파괴하는 기술은 물리적인 방법과 화학적인 방법으로 나눌 수 있으며, 물리적인 방법으로는 세포가 기계적인 힘으로 파괴되어 지며, 화학적인 방법은 세포벽에 영향을 미치는 화학약품에 노출되어 세포가 용해되는 것이다. 배춧잎을 70℃보관후 막자사발에 곱게 간다. 그 이유는 동물세포에 사용하는 라이소자임은 식물세포에는 아무런 영향을 끼치지 못한다. 대부분의 세포벽 형태에는 특별한 절단효소가 유용하지만 냉동시킨 재료를 막자사발에 가는 것과 같은 물리적인 기술이 종종 효과적일 수도 있다. 세포를 둘러싸는 막과 벽을 분해하기 위해 Extraction buffer를 사용한다. extraction buffer는 Tris,Nacl,EDTA 그리고SDS로 이루어진 것이다. EDTA는 세포외피의 전체구조를 유지하기 위해 필수적인 마그네슘 이온을 제거하고 DNA를 절단할 수 있는 세포내 효소를 억제 시킨다. SDS는 세제로서, 지방분자를 제거시켜 용해과정을 도와주어 세포막의 파괴를 야기시킨다. 첨가후 조심스럽게 섞어주고 새 튜브에 500ml씩 분류한다.

참고 자료

1)필수세포생물학, Alberts 외 6. 박상대역, 교보문고, 1999年, 173~174
2)유전자진단의 이론과 실제, 이홍규 김영설 , 한의학, 1999年, pp29~32
3)유전자클로닝입문, T.A Brown 저.강종백외 2역, 월드사이언스, 1998年 3판, pp32~37
4)www.yahoo.co.kr (야후 백과사전)
5)www.dsency.co.kr/main/htm

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