형질전환(대장균dna전기영동관찰)

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최초 등록일: 2011.11.14
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전기영동 레포트입니다.

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◆실험방법
① 아이스버킷에 아이스를 넣을 준비, -70℃에 보관중인 Competent cell을 아이스에 꽂아서 녹였다.
② 100㎛ Competent cell에 DNA를 50pg 넣고 30분 동안 기다렸다.
10ng/ml 인데 50pg넣으려면 5ml
(1mg=1000ng=1000000pg / 1ng=1000pg)
③ 42℃ 항온수조에 45초 동안 담궈 두었다.(큐브를 흔들지 않는다)
④ 2분 동안 아이스에 꽂아뒀다.
⑤ SOC 1ml을 첨가 225RPM 37℃에서 1시간 동안 배양했다.
⑥ 배양된 SOC를 가지고 적당한량을 희석해서 LB plate(0.01% ampicillin)에 도말했다.
⑦ sample배지도 만들었다.
⑧P1 250ml→1분 원심분리→액체배지제거→1분 원심분리→액체배지제거→대장균만 남김
⑨P2 250ml→4번 정도 뒤집어줌→lysis×2

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