Western Blot

소개글

Western Blot 에 관한 기본적인 레포트

목차

없음

본문내용

Subject
Western Blot

Object
Transfer 하여 얻어진 membrane 을 Western Blot 하여 찾는 단백질을 확인한다.

Introduction
Western blot
특정한 protein을 찾기 위해 먼저 gel electrophoresis 를 이용해서 protein을 size 순서로 분리해 낸다. 그 뒤 Transfer 를 이용해서 protein 이 분리된 상태로 gel에서 membrane으로 이동하게 한다. 그리고 그 membrane을 가지고 표면에 항체가 비특이적으로 붙는 것 을 방지하기 위해 blocking을 한다. 이 때 blocking 하는 단백질의 종류는 상관이 없으며, 주로 milk나 Bovain protein을 쓴다. blocking 과정이 끝나고 우리가 찾는 protein에 대한 항체를 membrane과 반응 시켜 항체가 protein에 결합하도록 한다. 항체에는 효소가 들어 있고 항원-항체 반응으로 항체가 항원에 붙게 된 뒤 효소에 대한 기질을 넣어주면 항체에 포함된 효소에서 기질반응이 일어나게 되어, 색을 발한다거나 하는 형태로 특정 protein을 찾게 해 줄 수 있다.

참고 자료

http://www.komabiotech.com/shop/
http://en.wikipedia.org/wiki/Western_blot